リンパ節発生過程における高内皮細静脈を介してリンパ球集積の分子機構

1999 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 11770170
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 田中 稔之 大阪大学, 医学系研究科, 助教授 (30217054)
• キーワード: 高内皮細胞 / リンパ節 / 遺伝子発現プロフィル / cDNAクローニング / 器官形成 / 接着分子 / EST / リンパ球再循環

研究概要

リンパ節原基へのリンパ球集積に関与する機能分子を同定することを目的とし、本年度は胎仔期のhigh endothelial venule(HEV)と類似の形質を持つ粘膜リンパ組織由来MAdCAM-1^+HEVに発現する「機能分子群の探索」と「新規遺伝子の構造決定」を行った。
【1】MAdCAM-1^+HEVの遺伝子発現プロフィル解析による機能分子群の探索
精製したMAdCAM-1^+HEVから3'末端特異的cDNAライブラリを作製し、2、101クローンの塩基配列を決定した。同一配列(Gene Signature:GS)をグループ化した後に、出現頻度解析を通じて遺伝子発現プルフィルを得た。データベース検索の結果、MAdCAM-1^+HEVに発現が認められた1,304のGSのうち、378は既知遺伝子であり926が新規遺伝子であった。他の35のライブラリ解析リストとの比較の結果、411GSがMAdCAM-1^+HEV特異的に発現し、そのうち383GSが新規遺伝子であった。MAdCAM-1^+HEVには炎症性血管に発現する分子群が選択的に検出され、リンパ球集積への関与が示唆された。また、ケモカイン結合性分子Duffy glycoproteinなどはHEVに選択的に発現することがin situ hybridizationにより確認された。
【2】MAdCAM-1^+HEVに発現する新規遺伝子の解析
遺伝子発現プロフィル解析においてHEV特異的に発現が認められた新規分子のうち、最も発現量の多いGS12070に着目しcDNAクローニングを行った。その結果、GS12070は分子内に特徴的なロイシンリッチリピート構造を有する分泌型蛋白質であることが明らかになった。

研究成果

• [文献書誌] Iizuka T.: "Stage-specific expression of mucosal addressin cell adhesion molecule-I during embryogensis in rats"J. Immunol.,. (in press).
• [文献書誌] Izawa,D.: "Expression profile of acitve genes in mouse lymph node high endothelial cells"Int, Immounol.. 11. 1989-1997 (1999)
• [文献書誌] Hiraoka N.: "A novel, high endothelial venule-specific sulfotransferase expresses 6-sulfosialyl Lewis x, an L-selectin ligand displayed by CD34"Immunity. 11. 79-89 (1999)
• [文献書誌] Lou Z.: "Analysiss of the mode of action of a novel immunosuppressant FTY720 in mice"Immunopharmacology. 41. 199-207 (1999)
• [文献書誌] Goda K.: "Characterization of an apparently conserved epitope in E-and P-selection identified by dual-specific monoclonal antibodies"Eur.J. Immunol.. 29. 1551-1560 (1999)
• [文献書誌] Kanoh N.: "Constitutive expression of GlyCAM-1 core protein in the rat cochlea"Cell Adhes .Commun.. 7. 259-266 (1999)