本研究では円錐角膜における細胞外マトリックスの分解系の亢進、特にマトリックスメタロプロテアーゼ(MMP)の発現を遺伝子レベルおよびタンパク質レベルで解析することを目的とし、既に提出した実験計画概要に基づいて、初年度は各種MMPのタンパク質レベルでの局在を円錐角膜と正常角膜で比較検討した。免疫組織化学を用いた解析の結果、正常角膜ではMMP-2、MMP-3、MMP-7、MMP-9、MT1-MMPは角膜上皮において発現しており、一部角膜実質細胞周囲にも発現していた。今回検討した臨床検体の範囲では、正常角膜と円錐角膜でのこれらの抗体に対する染色性の顕著な差は認められなかった。現在、ゼラチンザイモグラフィーおよびWestern blottingによりこれらの酵素の活性等を比較検討中である。更に来年度にわたって、in situ ハイブリダイゼーションおよび半定量的RT-PCRを行うことによって、これらの酵素のmRNA レベルでの局在等を解析し、円錐角膜発症の過程における分解酵素の役割を解明する。
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