| 研究概要 |
力学的負荷の一つであるシェアストレスを株化骨細胞MLO-Y4に、0〜1.44dyneかけ、プロスタグランジン(PG)合成の律速酵素であるサイクロオキシゲナーゼ-2(COX-2)をRT-PCR法によってその発現量を検討すると、ストレスの大きさに応答して発現が増加した。1.44dyneのストレスで0h〜l2hまでの時間変化に対するCOX-2の発現量は、3hがピークであった。その変化量をLightCyclerを用いて定量すると、0hと3hではPCRのサイクル数で12サイクルほどの差が認められ、その差は理論的に2^<12>倍であると計算された。このとき発現するPGを薄層クロマトグラフィーによって同定したところ、もっとも多く発現しているのはPGE2であり、その他PGF2αやPGD2なども僅かに発現していた。骨細胞MLO-Y4と骨芽細胞MC3T3-E1細胞のPGリセプターの発現をRT-PCR法によって同定すると、MLO-Y4では、EP1,EP3,EP4,FP,IPの発現が、MC3T3-E1では、EP1,EP3,EP4,FPの発現が認められた。また、マウスの長管骨より骨細胞のRNAを注出し、RT-PCR法により同様の実験を行ったところ、EP4とIPの発現のみが認められた。また、MLO-Y4において、EP4の発現変化を検討したところ、シェアストレスに応答して3hをピークに発現量が増加していた。以上のこれまでの結果から、骨細胞はシェアストレスに応答してPGE2を合成し、EP4リセプターを介して、そのシグナルを下流に伝えていることが明らかとなった。
|
