う蝕を誘発するCandida albicansの歯質への付着機構の解明

2000 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 11771219
• 研究機関: 広島大学
• 研究代表者: 牧平 清超 広島大学, 歯学部・附属病院, 助手 (80304450)
• キーワード: Candida albicans / ゼラチン / コラーゲン

研究概要

平成11年度は、コラーゲンおよびゼラチンアフィニティーカラムを作製し、コラーゲンおよびゼラチン結合Candida由来膜蛋白の同定を試みた。はじめにアフィニティーカラムにCandida由来膜蛋白を展開し、溶出液をSDSポリアクリルアミド電気泳動後、銀染色を行った。
その結果、ゼラチン結合Candida由来膜蛋白の候補として分子量30kDのバンドが検出された。本年度は、そのバンドの大量精製およびN末端アミノ酸配列の決定を試みた。
【平成12年度前半】
Candida albicansをzymolaseで処理した後、detergentにより膜蛋白を大量抽出した。抽出した大量の膜蛋白を高速液体クロマトグラフィーを用いてゼラチンアフィニティーカラムに展開後、さらに凍結乾燥により、濃縮精製した。
【平成12年度後半】
濃縮精製したゼラチン結合Candida由来膜蛋白の同定を目的として、メンブレンに転写後、N末端アミノ酸配列の決定を試みた。しかしながら、メンブレンへの転写効率が悪く、自動アミノ酸シークエンサーを用いた解析でも、目的のバンドのN末端アミノ酸配列の決定までは至らなかった。しかしながら、Candida膜上にゼラチン認識蛋白の存在が強く示唆された。

研究成果

• [文献書誌] H.Nikawa, et al.: "Relationship between thigmotropism and Candida biofilm formation in vitro."Mycopathologia. 144(3). 125-129 (1999)
• [文献書誌] H.Nikawa, et al.: "Effect of serum concentration on Candida biofilm formation on acrylic surfaces."Mycoses. 43(3-4). 139-143 (2000)
• [文献書誌] H.Nikawa, et al.: "Interaction between thermal cycled resilient denture lining materials, salivary and serum pellicles and Candida albicans in vitro. Part II."J.Oral Rehabil.. 27(2). 124-130 (2000)
• [文献書誌] H.Nikawa, et al.: "Candida albicans growth on thermal cycled materials for maxillofacial prostheses in vitro."J.Oral Rehabil.. (in press).
• [文献書誌] S.Makihira, et al.: "Growth of Candida Species on Commercial Denture Adhesives in vitro."Int.J.Prosth.. 14(1). 48-52 (2001)
• [文献書誌] S.Makihira, et al.: "Bacterial and candidal abhesion to intact and denatured collagen in vitro"Mycoses. (in press).