1分子イメージングによるシャペロニンの作用機構の解明

1999 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 11780440
• 研究機関: 東京工業大学
• 研究代表者: 田口 英樹 東京工業大学, 資源化学研究所, 助手 (40272710)
• キーワード: 分子シャペロン / GroEL / 1分子イメージング / フォールディング

研究概要

1分子のシャペロニンが機能するようすをリアルタイムで調べるための第一歩としてシャペロニンGroELとGroESが結合解離するようすを1分子レベルで観察することに成功した。また、この実験系を発展させて変性タンパク質の折れ畳みの1分子観察を行った。Green Fluorescent Protein(GFP)とGroEL変異体を使用して1分子タンパク質フォールディングを見ることができた。以上の観察の時間経過を統計的に解析した結果、これまで知られていなかった新しいGroEL/ES複合体を検出することができた。

研究成果

• [文献書誌] Aoki K.: "GroEL binds artificial proteins with random sequences"J.Biol.Chem.. (in press). (2000)
• [文献書誌] Pack C-G.: "Effect of electrostatic interactions on the binding of charged substrate to GroEL studied by highly sensitive fluorescence correlation spectroscopy"Biochem.Biophys.Res.Commun.. 267. 300-304 (2000)
• [文献書誌] Sakikawa C.: "On the maximum size of proteins to stay and fold in the cavity of GroEL underneath GroES"J.Biol.Chem.. 274. 21251-21256 (1999)
• [文献書誌] Pack C-G.: "Analysis of interaction between chaperonin GroEL and its substrate using Fluorscence correlation spectroscopy"Cytometry. 36. 247-253 (1999)