神経細胞におけるRhoを介した機能及びその作用機序の解析

2000 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 11780579
• 研究機関: 京都大学
• 研究代表者: 加藤 裕教 京都大学, 生命科学研究科, 助手 (50303847)
• キーワード: Rho / 神経突起伸展 / PC12細胞

研究概要

神経細胞において、Rhoファミリーの低分子量G蛋白質に属するRacとCdc42が神経突起の伸展に、Rhoがその退縮に関与していることが近年明らかになってきているが、他のRhoファミリーG蛋白質についてはほとんど解析されていなかった。申請者は、神経細胞のモデル細胞として多用されているPC12細胞を用いて、RhoファミリーG蛋白質に属するRhoGとRnd1について、今年度以下の結果を明らかにした。
1)低分子量G蛋白質RhoGの神経突起伸展への関与
PC12細胞に野生型RhoGを発現させたところ、NGF非存在下においても神経突起の伸展が見られ、この神経突起伸展はRac1やCdc42のドミナントネガティブ体により抑制された。また常時活性型RhoGを発現させた細胞では細胞内のRac1とCdc42の活性の上昇が見られた。一方、NGFよる神経突起伸展作用が野生型RhoGを発現させることにより促進され、逆にRhoGのドミナントネガティブ体によって抑制されることを見いだした。以上の結果から、RhoGはPC12細胞において、Rac1とCdc42の活性を制御し、NGFによる神経突起伸展に関与していると考えられた。
2)低分子量G蛋白質Rnd1による神経細胞の突起形成作用
PC12細胞にRnd1を発現させたところ、細胞辺縁部のcortical actin filamentの減少が見られ、非常に細い多数の突起が形成された。このようなRnd1による突起形成作用は、Rac1のドミナントネガティブ体により抑制された。以上の結果から、PC12細胞においてRnd1はcortical actin filamentを解体することによってRac依存的な突起形成を引き起こす。

研究成果

• [文献書誌] Katoh,H.,Yasui,H.,Yamaguchi,Y.,Aoki,J.,Fujita,H.,Mori,K.,and Negishi,M.: "Small GTPase RhoG is a key regulator for neurite outgrowth in PC12 cells."Molecular and Cellular Biology. 20・19. 7378-7387 (2000)
• [文献書誌] Aoki,J.,Katoh,H.,Mori,K.,and Negishi,M.: "Rnd1, a novel Rho family GTPase, induces the formation of neuritic processes in PC12 cells."Biochemical and Biophysical Research Communication. 278・3. 604-608 (2000)
• [文献書誌] Hasegawa,H.,Katoh,H.,Fujita,H.,Mori,K.,and Negishi,M.: "Receptor isoform-specific interaction of prostaglandin EP3 receptor with Muskelin."Biochemical and Biophysical Research Communication. 276・1. 350-354 (2000)
• [文献書誌] Yamaguchi,Y.,Katoh,H.,Yasui,H.,Aoki,J.,Nakamura,K.,and Negishi,M.: "Gα12 and Gα13 inhibit Ca^<2+>-dependent exocytosis through Rho/Rho-associated kinase-dependent pathway."Journal of Neurochemistry. 75・2. 708-717 (2000)
• [文献書誌] Hasegawa,H.,Katoh,H.,Yamaguchi,Y.,Nakamura,M.,Futakawa,S.,and Negishi,M.: "Different membrane targeting of prostaglandin EP3 receptor isoforms dependent on their carboxy-terminal tail structures."FEBS Letters. 473・1. 76-80 (2000)
• [文献書誌] Fujita,H.,Katoh,H.,Hasegawa,H.,Yasui,H.,Aoki,J.,Yamaguchi,Y.,and Negishi,M.: "Molecular decipherment of Rho effector pathways regulating tight-junction permeability."Biochemical Journal. 346・3. 617-622 (2000)