発生工学的手法を応用したIFN-γおよびIL-6の肝炎における役割の解析

1999 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 11780603
• 研究機関: 信州大学
• 研究代表者: 田川 陽一 信州大学, 医学部, 助手 (70262079)
• キーワード: 肝炎 / コンカナバリンA / IFN-γ / IL-6 / 抗IL-6抗体 / ノックアウトマウス / トランスジェニックマウス / テトラサイクリン誘導プロモーター

研究概要

コンカナバリンA(Con A)誘導肝炎は、ヒトウイルス性または自己免疫性肝炎のマウスモデルとして知られている。Con Aにより誘導されたIFN-γがFas-FasLシステムを活性化することによって肝臓細胞のアポトーシスを誘導し肝障害を起こす。このとき、IFN-γがIL-6の発現を誘導することがIFN-γノックアウト(KO)マウスを用いてわかった。ところが、IFN-γKOマウスがCon Aに対し低感受性であったのに対して、IL-6KOマウスは野生型と比べても高感受性であった。この矛盾する結果を考察するために、時期特異的にIL-6レベルを制御できる抗IL-6抗体系を用いて、IL-6の詳細な役割を調べることにした。Con A投与後に抗IL-6抗体を投与すると、一時的に肝障害レベルが抑制された。一方、Con A投与前に抗IL-6抗体でマウスを前処理しておくと、コントロールに比べて肝障害レベルが上昇することがわかった。これらの結果は、Con A投与直後に誘導されるIL-6は肝炎に対して抑制的に働くが、Con A投与後後半のIL-6は肝炎を悪化させると考えられる。また、ノックアウトマウスの実験の限界と同時に抗体実験の有用性を示した。
Con Aを投与するとIFN-γやIL-6をはじめとしてIL-1、IL-2、IL-4といった多くのサイトカインが誘導されるために、一般的な肝炎発症におけるIL-6やIFN-γの詳細な解析は難しい。そこで、組織特異的誘導型IFN-γやIL-6過剰発現マウスを作成し、循環器系または肝臓特異的にIFN-γやIL-6を過剰発現させるシステムの開発を行っている。テトラサイクリン誘導プロモータの下流にRT-PCRにより得たマウスIFN-γ cDNAを連結したレトロウイルスベクターを構築した。現在、ES細胞のこのベクター系を導入し、誘導剤に対する高感受性クローンの選択を行っている。

研究成果

• [文献書誌] Tagawa, Y., et al.: "Bimodal role of endogenous interleukin-6 in concanavalin A-induced hepatitis in mice."J. Leukoc. Biol.. 67. 90-96 (2000)
• [文献書誌] Hino, A., et al.: "Interferon-γ priming is not critical for IL-12 production of murine spleen cells."Cytokine. 12. 12-20 (2000)
• [文献書誌] Kotani, M., et al.: "Involvement of autoimmunity against type II collagen in the development of arthritis in mice transgenic for the human T cell leukemia virus type I tax gene."Eur. J. Immunol.. 29. 54-56 (1999)
• [文献書誌] Shimada, S., et al.: "Generation of polymeric immunoglobulin receptor-deficient mouse with marked reduction of secretory IgA."J. Immunol.. 163. 5367-5373 (1999)
• [文献書誌] Tsuji, H., et al.: "Alleviation of lipopolysaccharide-induced acute liver injury in Propionibacterium acnes-primed IFN-γ-deficient mice by a concomitant reduction of TNF-α, IL-12 and IL-18 production."J. Immunol.. 162. 1049-1055 (1999)
• [文献書誌] Hyodo, Y., et al.: "IL-18 Up-Regulates Perforin-Mediated NK Activity Without Increasing Perforin Messenger RNA Expression by Binding to Constitutively Expressed IL-18 Receptor."J. Immunol.. 162. 1662-1668 (1999)
• [文献書誌] Igarashi, I., et al.: "Roles of CD4(+)T cells and gamma interferon in protective immunity against Babesia microti infection in mice."Infect. Immun.. 67. 4143-4148 (1999)
• [文献書誌] Sawai, N., et al.: "Role of gamma interferon in Helocobacter pylori-induced gastric inflammatory responses in a mouse model."Infect. Immun.. 67. 279-285 (1999)
• [文献書誌] Kobayashi, M., et al.: "Toxoplasma gondii: difference of invasion into tissue of digestive organs between susceptible and resistant strain and influence of IFN-gamma in mice inoculated with the cysts perorally."J. Parasitol.. 85. 973-975 (1999)
• [文献書誌] He, J., et al.: "Kinetics of cytokine production in the cornea and trigeminal ganglion of C57BL/6 mice after corneal HSV-1 infection."J. Interferon Cytokine Res.. 19. 609-615 (1999)