| 研究概要 |
牛ウイルス性下痢粘膜病(BVD-MD)の病原因子であるBVD-MDウイルス(BVDV)の遺伝子のポリメラーゼ連鎖反応(PCR)による解析過程で、BVD-MD発症およびBVDV感染成立において、これまでの研究によりBVDVのE1遺伝子が重要な役割を担っている可能性が示唆された。E1はウイルスの中和抗体に関与している他の2つの糖蛋白gp48およびgp53のアンカーとして機能しているものと考えられている。
そこで本研究においては、E1領域のPCR増幅産物をプローブとして、宿主細胞のゲノミックサザンブロットハイブリダイゼーションを行い、そのハイブリバンドを回収してその塩基配列を解読した。その結果,宿主細胞のゲノムDNA中にBVDVのE1遺伝子に相同性の高い領域が存在していることが確認できた。また、宿主細胞におけるE1類似蛋白の発現の有無を確認するため、BVDVのE1遺伝子をPCR法により増幅し、これを発現ベクターに組み込んでリコンビナントE1を大腸菌に産生させることが可能となった。さらに、ウイルス中和試験に使用されているウシ抗BVDV抗血清を用いたウエスタンブロッテング法によって、このリコンビナントE1の抗原性状を検索したところ、リコンビナントE1とウシ抗BVDV抗血清は反応しなかった。
以上の成績から、宿主細胞がBVDVのE1領域と相同性の高い領域を有しているため、E1蛋白は宿主の免疫機構に認識されないものと考えられた。このメカニズムがBVDVの感染成立や発症機構に何らかの役割を担っているものと推測された。
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