| 研究分担者 |
土屋 慎一 慶應義塾大学, 医学部, 助手 (70276327)
大前 和幸 慶應義塾大学, 医学部, 教授 (60118924)
吉村 泰典 慶應義塾大学, 医学部, 教授 (10129736)
谷垣 礼子 慶應義塾大学, 医学部, 助手 (00265852)
松田 紀子 慶應義塾大学, 医学部, 助手 (80286541)
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| 研究概要 |
c-kitは繊維芽肉腫のprotooncogeneとして発見され,正常精巣のLeidig細胞およびspermatogoniaに存在し,分化増殖への関与が示唆されている。精巣においてspermatogoniaの増殖・分化に関わり,受容体型チロシキンナーゼファミリーに属するprotooncogeneであるc-kitが,いかに精子形成に影響を及ぼすのか検討するために,ホモおよびヘテロのc-kit mutantマウスを用いてgerm cellにおけるc-kitの発現をflow cytometryで分析し,精子形成過程での障害の分化stage,とくにspermatogoniaの減数分裂機構に関わるc-kitの関与を検索した。生後10日および11週齢マウスC57black(wild type+/+),細胞膜貫通部を含む78個のアミノ酸の欠落がある突然変異のへテロW/+,790番目のアミノ酸の点突然変異のヘテロW^v/+,機能喪失性突然変異遺伝子を2個持つW/W^vを使用した。各マウスより精巣細胞を分離し,抗マウスc-kit抗体(CD117)と反応させ,flow cytometryでc-kit陽性細胞率を解析した。生後10日の幼若wild typeマウスではc-kit陽性細胞は3.8%であったのに対し,生後11週齢の性成熟マウスでは0.5%であった。また,生後10日のヘテロmutantマウスにおける抗c-kit抗体陽性細胞の比率は,W/+およびW^v/+では各々2%であり,wild typeの約2分の1と低い発現率であった。ヘテロmutantマウスでは精子形成の抑制は認められなかったが,生後10日および11週齢ともにW/W^vmutantマウスではwild typeおよびヘテロの精巣に比較し,精巣重量および精巣細胞数は有意に低下していた。しかし,生後11週齢ではc-kit陽性率は2.5%と高く,精子形成の強い抑制とmaturation arrestの状態が示された。c-kitは精子形成過程の初期段階に深く関与し,男性不妊とくにmaturation arrestの発生にかかわる因子であることが示唆された。
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