1999 年度実績報告書

In vitro遺伝子ノックアウトによる細胞周期制御分子の機能解析

研究課題

研究課題/領域番号	11877042
研究機関	熊本大学
研究代表者	佐谷秀行熊本大学, 医学部, 教授 (80264282)
キーワード	DT40 / HCT1 / fzr / サイクリンA / サイクリンB / p27 / チェックポイント / 遺伝子破壊 / 細胞周期
研究概要	ニワトリBリンパ細胞株DT40は、高等真核細胞で唯一ターゲットインテグレーションが高頻度に起こる細胞であり、本細胞を用いることにより特定の遺伝子をin vitroで破壊し、その機能を詳細に解析することが可能である。私達は酵母においてサイクリンA及びサイクリンBの分解に機能する分子である。HCT1(ショウジョウバエのホモログはfizzy-related(fzr)と呼ぶ)遺伝子のトリホモログのノックアウトを行い、高等真核細胞における機能について解析することを本研究計画の目的とした。本年度の成果を要約すると: 1)HCT1/fzrのトリホモログのcDNAおよびゲノムDNAのクローニングを行った。 2)DT40細胞においてHCT1/fzr遺伝子の破壊を行ったところ、G1期に本来検出できない分裂期サイクリン(サイクリンA、サイクリンB)が高く発現していることが認められた。DT40野生株はG1サイクリンの特異的阻害分子であるp27を発現させるとG1期で停止するのに対し、変異株ではS期に突入することが認められ、分裂期サイクリンの不定期発現(unscheduled expression)は細胞周期の制御異常を来たすことが分かった。更に、このHCT1/fzr遺伝子破壊株にヒトh-fzr遺伝子を強制発現したところG1期においても分裂期サイクリンが検出されなくなり、p27発現によってG1期に停止した。

研究成果
(6件)

すべてその他

すべて文献書誌 (6件)

[文献書誌] Masuko,N. et al.: "Interaction of NE-dlg/SAP102,a neuronal and endocrine tissue-specific MAGUK protein, with calmodulin and PSD-95/SAP90."J. Biol. Chem.. 274. 5782-5790 (1999)
[文献書誌] Kuwahara,H. et al.: "A novel NE-dlg/SAP102-associated protein, p51-nedasin, related to the amidohydroalse superfamily, interferes with the association between NE-dlg/SAP102 and NMDA receptor."J. Biol. Chem.. 274. 32204-32214 (1999)
[文献書誌] Koga,H. et al.: "A humain homolog of Drosophils lethal (3) malignant brain tumor (1(3)mbt) Protein associates with condensed mitotic chromodomes."Oncogene. 18. 3799-3809 (1999)
[文献書誌] Okamoto,I. et al.: "CD44 cleavagc induces by a membrane-associated metallopotease plays a critical role in tumor cell migration."Oncogene. 18. 1435-1446 (1998)
[文献書誌] Okamoto,I. et al.: "Regulated CD44 Cleavage Under the Control of Protein Kinase C, Calcium Influx and the Rho Family of Small G Proteins."J. Biol. Chem.. 274. 25525-25534 (1999)
[文献書誌] Ito,K. et al.: "Calcium influx triggers the sequential proteolysis of exteacellular and cytoplasmic domains of E-cadherin, leading, leading to loss of β-catenin from cell-cell contacts."Oncogene. 18. 7080-7090 (1999)

1999 年度 実績報告書

In vitro遺伝子ノックアウトによる細胞周期制御分子の機能解析

研究代表者

佐谷 秀行 熊本大学, 医学部, 教授 (80264282)

研究成果

[文献書誌] Masuko,N. et al.: "Interaction of NE-dlg/SAP102,a neuronal and endocrine tissue-specific MAGUK protein, with calmodulin and PSD-95/SAP90."J. Biol. Chem.. 274. 5782-5790 (1999)

[文献書誌] Kuwahara,H. et al.: "A novel NE-dlg/SAP102-associated protein, p51-nedasin, related to the amidohydroalse superfamily, interferes with the association between NE-dlg/SAP102 and NMDA receptor."J. Biol. Chem.. 274. 32204-32214 (1999)

[文献書誌] Koga,H. et al.: "A humain homolog of Drosophils lethal (3) malignant brain tumor (1(3)mbt) Protein associates with condensed mitotic chromodomes."Oncogene. 18. 3799-3809 (1999)

[文献書誌] Okamoto,I. et al.: "CD44 cleavagc induces by a membrane-associated metallopotease plays a critical role in tumor cell migration."Oncogene. 18. 1435-1446 (1998)

[文献書誌] Okamoto,I. et al.: "Regulated CD44 Cleavage Under the Control of Protein Kinase C, Calcium Influx and the Rho Family of Small G Proteins."J. Biol. Chem.. 274. 25525-25534 (1999)

[文献書誌] Ito,K. et al.: "Calcium influx triggers the sequential proteolysis of exteacellular and cytoplasmic domains of E-cadherin, leading, leading to loss of β-catenin from cell-cell contacts."Oncogene. 18. 7080-7090 (1999)

1999 年度実績報告書

佐谷秀行熊本大学, 医学部, 教授 (80264282)