人工骨髄の構築による新しいB細胞分化系の確立

1999 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 11877058
• 研究機関: 東京工業大学
• 研究代表者: 工藤 明 東京工業大学, 生命理工学部, 教授 (70178002)
• 研究分担者: 猪早 敬二 東京工業大学, 生命理工学部, 助手 (70302958) ; 竹下 淳 東京工業大学, 生命理工学部, 助手 (50263009)
• キーワード: 骨髄微細環境 / インターロイキン7 / プレB細胞 / ストローマ細胞 / ハイドロキシアパタイト

研究概要

B細胞は骨髄の微細環境下で骨髄幹細胞から分化する。in-vitroのB細胞培養系において、ストローマ細胞は骨髄微細環境のかわりができ、インターロイキン7(IL7)の存在下でプレB細胞の増殖をサポートする。我々はこのin-vitroの培養系においてプレート上のストローマ細胞は骨髄微細環境を代替するには不十分であると考え、ストローマ細胞から骨への細胞分化を誘導できるハイドロキシアパタイト(HA)を培養系に応用した。HAをストローマ細胞でおおった後、その上で骨髄細胞と脾臓細胞をIL-7の存在下で培養した。7日後、新しいプレB細胞のポピュレーションが現れた。
それは1)B220low、BP^+CD43^+及び代替L鎖(VpreB,【lambda bar】5)陽性のプレB細胞が得られたこと。
2)7週令のマウスの脾臓由来のプレB細胞が得られたことは、成体マウスの脾臓から得られたプレB細胞としてその特徴を明らかにできた初めての実験例である。すべての確立したプレB細胞は未熟B細胞(IgM^+)へ分化できた。
我々はHAの構造がIL7応答性の未安定なプレB細胞を安定化させることにより新しいポピュレーションが得られたと考えている。

研究成果

• [文献書誌] Kawaguchi,J.: "Expression and function of the splice variant of the human cadherin-11 gene in subordination to intact cahderin-11"J. Bone Miner. Res.. 14,5. 764-774 (1999)
• [文献書誌] Horiuchi K.: "Identification and characterization of a novel protein, periostin with restricted expression to periosteum and periodontal ligament and increased expression by transforming growth factor β"J. Bone Miner. Res.. 14,7. 1239-1249 (1999)
• [文献書誌] Kashima T.: "Anomalous cadherin expression in osteosarcoma: Possible relationships to metastasis and morphogenesis"Amer.J. Pathol.. 155,5. 1549-1555 (1999)
• [文献書誌] Miyazaki T.: "λ5 is required for rearrangement of the lg κlight chain gene in pro-B cell lines"Int. Immunol.. 11. 1195-1201 (1999)
• [文献書誌] Sato H.: "Stage-specific culture of preB cells in porous hydroxyapatite ceramics"Bioceramics. 12. 211-214 (1999)
• [文献書誌] Azuma Y.: "TNF-α induces differentiation of and bone resorption by osteoclasts"J. Biol. Chem.. (in press).
• [文献書誌] Kato I.: "Inducible differentiation and apoptosis of the preB cell receptor positive pre B cell line"Int. Immunol.. (in press). (2000)
• [文献書誌] Kaji K.: "Gamete fusion process is defective in eggs of Cd9 knock-out mice"Nature Genetics.. (in press). (2000)
• [文献書誌] 堀内圭輔: "感染・炎症・免疫:骨を造る遺伝子、壊す遺伝子ーCbfal および OPG/OCIF,ODF/OPGL を中心とした近年の展開、"医薬の門社. 20 (1999)
• [文献書誌] 王 丹: "実験医学:免疫グロブリン遺伝子再構成とB細胞分化"羊土社. 20 (1999)
• [文献書誌] 竹下 淳: "新臨床医のための分子医学シリーズ: サイトカインと骨代謝・骨疾患、サイトカインと疾患"羊土社. (1999)
• [文献書誌] 加藤いぶき: "Annual Review 免疫 2000: プレB細胞レセプターシグナルの機能"中外医学社. 8 (1999)