1999 年度実績報告書

Αβブレイカー蛋白によるアルツハイマー病の遺伝子治療に関する基礎的研究

研究課題

研究課題/領域番号	11877161
研究機関	埼玉医科大学
研究代表者	深津亮埼玉医科大学, 医学部, 教授 (10113614)
研究分担者	続佳代札幌医科大学, 医学部, 助手 (60207420)
キーワード	アルツハイマー病(AD) / アミロイドβ蛋白(Αβ) / Αβブレイカー蛋白 / 遺伝子治療 / 抗Αβブレイカー蛋白抗体 / リポフエクタミン法
研究概要	Αβブレイカー蛋白によってアミロイドの沈着を阻害することによりアルツハイマー病に対する遺伝子治療の可能性を検討するために、Αβブレイカー蛋白(すなわちLPFFD)を発現するべクター作成、効率のよい遺伝子導入法の確立などの基礎的検討を行った。 I)遺伝子導入法、ベクター樹立: 1)Αβブレイカー蛋白(すなわちLPFFD)の発現するべクターの作成: Αβブレイカー蛋白のアミノ酸配列LPFFDに対応するDNAを合成してアデノウイルス発現べクター(pTarget-T)に組み込みを行った。そのべクターをクローニングしてシークエンスして配列を確認した。発現べクターは正しく作成することが出来た。 2)Αβブレイカー蛋白に対する抗体の樹立: Αβブレイカー蛋白をアミノ酸配列に従って合成した。合成ペプチドにkeyholeを結合させて抗原としウサギを免疫して型の通り多クローン抗体を樹立を試みた。抗体は樹立され、ELISAで抗体活性が高いことは確認できたが、特異性に多少の問題が残され、今後の課題が残された。 II)標的細胞への遺伝子導入法の樹立;Αβブレイカー蛋白遺伝子発現べクターを標的細胞に導入法の検討: 標的細胞としてヒト抹消血単球、ならびにマウス腹腔マクロファージを採取・分離して培養した。リポフェクトアミンを用いたリポソーム法などによりΑβブレイカー蛋白遺伝子発現べクターを上記細胞に導入することを現在試みている。

研究成果

(8件)

すべてその他

すべて文献書誌 (8件)

[文献書誌] Hayashi Y, Fukatsu R, Tsuduki K et al: "Evidence for presenilin-1 involvment in amyloid angiopthy in the Alzheimer's Disease-affected brain"Brain Research. 789. 307-314 (1998)
[文献書誌] Sasaki N, Fukatsu R, Tsuduki K et al: "Advanced glycation end products involved in Alzheimer's disease and other Neurodegenerative disease"American Journal of Parthology. 153. 1149-1155 (1998)
[文献書誌] Tsuduki K, Fukatsu R et al: "Sequestration mechanism for Amyloid β,TTR play a role in the kidney"Society for Neuroscience. 282.2 (1998)
[文献書誌] 深津亮,続佳代,吉田拓他: "APP並びに、PS-1の局在とその発現に与える影響 -培養細胞における免疫病理学的、および分子生物学的検討-"Neuropathology. 19. (1999)
[文献書誌] Nakano N, Hatakeyama Y, Fukatsu R, et al: "Eye-head coordination abnormalities and regional cerebral blood flow in Alzheimer's disease"Prog Neuropsychopharmacol Biol Psychiatry. 23. 1053-1062 (1999)
[文献書誌] Tsuzuki K, Fukatsu R, Yamaguchi H, et al: "Transthyretin binds amyloid β peptides,Αβ1-42 and Αβ1-40 to form complex in the autopsied human kidney-possible role of transthyretin for Αβ sequestration-"Neuroscience Letters. 281. (2000)
[文献書誌] 深津亮、続佳代: "IV 病因・病態「臨床精神医学講座」special issue第9巻アルツハイマー病"松下正明総編集三好好峰、小坂憲司責任編集中山書店. 13 (2000)
[文献書誌] 深津亮、中野倫仁: "「臨床精神医学講座」第12巻老年期精神障害、血管性痴呆"松下正明総編集本間昭、武田雅俊責任編集中山書店. 28 (1998)

1999 年度 実績報告書

Αβブレイカー蛋白によるアルツハイマー病の遺伝子治療に関する基礎的研究

研究代表者

深津 亮 埼玉医科大学, 医学部, 教授 (10113614)

研究成果

[文献書誌] Hayashi Y, Fukatsu R, Tsuduki K et al: "Evidence for presenilin-1 involvment in amyloid angiopthy in the Alzheimer's Disease-affected brain"Brain Research. 789. 307-314 (1998)

[文献書誌] Sasaki N, Fukatsu R, Tsuduki K et al: "Advanced glycation end products involved in Alzheimer's disease and other Neurodegenerative disease"American Journal of Parthology. 153. 1149-1155 (1998)

[文献書誌] Tsuduki K, Fukatsu R et al: "Sequestration mechanism for Amyloid β,TTR play a role in the kidney"Society for Neuroscience. 282.2 (1998)

[文献書誌] 深津 亮,続 佳代,吉田 拓 他: "APP並びに、PS-1の局在とその発現に与える影響 -培養細胞における免疫病理学的、および分子生物学的検討-"Neuropathology. 19. (1999)

[文献書誌] Nakano N, Hatakeyama Y, Fukatsu R, et al: "Eye-head coordination abnormalities and regional cerebral blood flow in Alzheimer's disease"Prog Neuropsychopharmacol Biol Psychiatry. 23. 1053-1062 (1999)

[文献書誌] Tsuzuki K, Fukatsu R, Yamaguchi H, et al: "Transthyretin binds amyloid β peptides,Αβ1-42 and Αβ1-40 to form complex in the autopsied human kidney-possible role of transthyretin for Αβ sequestration-"Neuroscience Letters. 281. (2000)

[文献書誌] 深津 亮、続 佳代: "IV 病因・病態「臨床精神医学講座」special issue第9巻 アルツハイマー病"松下正明 総編集 三好好峰、小坂憲司 責任編集 中山書店. 13 (2000)

[文献書誌] 深津 亮、中野倫仁: "「臨床精神医学講座」第12巻 老年期精神障害、血管性痴呆"松下正明 総編集 本間 昭、武田雅俊 責任編集 中山書店. 28 (1998)

1999 年度実績報告書

深津亮埼玉医科大学, 医学部, 教授 (10113614)

[文献書誌] 深津亮,続佳代,吉田拓他: "APP並びに、PS-1の局在とその発現に与える影響 -培養細胞における免疫病理学的、および分子生物学的検討-"Neuropathology. 19. (1999)

[文献書誌] 深津亮、続佳代: "IV 病因・病態「臨床精神医学講座」special issue第9巻アルツハイマー病"松下正明総編集三好好峰、小坂憲司責任編集中山書店. 13 (2000)

[文献書誌] 深津亮、中野倫仁: "「臨床精神医学講座」第12巻老年期精神障害、血管性痴呆"松下正明総編集本間昭、武田雅俊責任編集中山書店. 28 (1998)