| 研究概要 |
1,遺伝子導入C.elegansによるストレスの検出
線虫C.elegansのhsp90遺伝子のUTRを含む5'側上流部分とGFP遺伝子の融合遺伝子を作製し、線虫C.elegansに導入した。
この遺伝子導入C.elegansを、熱、カドミウム、亜セレン酸、pヒドロキシ水銀安息香酸のストレス下に置いたところ、いずれもGFPの発現が誘導された。一方、アルコール類や過酸化ストレスでは、GFPの発現誘導は観察されず、導入したhsp遺伝子の発現調節とストレスの種類に関連があることが示唆された。また、この遺伝子導入C.elegansは、導入遺伝子に関してホモになると不稔になり、ヘテロでのみ継代が可能であった。
2,hspmRNAの定量によるストレスの検出
GeneAmp2000装置で、線虫C.elegansのhsp及び細胞質アクチンmRNA量を、種々のストレス下で測定した。熱ストレスによって総mRNA量は、約2倍に増加し、この増加分の大半はhspファミリーmRNAに由来すると推定された。hsp90mRNAは、熱ストレスで約7倍に、カドミウム処理で約2倍に増加していた。
3,今後の方針
本年度までの実験によって、線虫C.eleganshsp遺伝子に着目した安全性評価システムの有効性が、着実に明らかになってきた。今後は、今回作製した遺伝子導入C.elegansの遺伝子発現調節機構の解析、新規遺伝子導入C.elegansの作製、種々ストレス下でのhsp遺伝子群mRNA量の定量及び突然変異体を用いた分析の高感度化を進める予定である。
|
