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2012 年度 実績報告書

ニンジン培養細胞におけるストレス応答性遺伝子 DcMYB1 の発現制御機構の解析

研究課題

研究課題/領域番号 11J07669
研究機関東京農工大学

研究代表者

宮原 平  東京農工大学, 大学院・工学府, 特別研究員(DC2)

キーワードアントシアニン / アシルグルコース依存型アントシアニン配糖化酵素
研究概要

ニンジン培養細胞におけるストレス応答性遺伝子DcMYB1の発現を抑制していることが示唆された転写抑制因子であるDcEILはエチレンシグナル応答性転写調節因子と相同性が高いことが明らかとなっていた。これよりDcEILのエチレンシグナル伝達経路への関与を調べるため、シロイヌナズナ植物体を用いた相補性試験を行うべく、シロイヌナズナのエチレン非応答性株(ein3)の種子を購入し、作成しておいたDcEIL過剰発現用コンストラクトをアグロバクテリウムにより導入した。作成した相補植物体(DcEIL/ein3)は黄化芽生え時のエチレン添加による試験において、コントロールである相補植物体(EIN3/ein3)と同様な根の成長阻害および茎頂のフックと呼ばれる特徴的なエチレン応答による表現形が観察された。このため、DcEILはニンジン培養細胞においてストレス応答経路およびエチレンシグナル伝達経路の双方に関与することが示唆された。一方、DcEILタンパク質を用いたDcMYB1プロモーター上の結合認識配列の特定に向けゲルシフトアッセイの条件を検討したがポジティブな結果は得られず、これ以上の研究続行は困難であると判断し、昨年度は予備実験として行っていた「シロイヌナズナにおけるアシルグルコース依存型アントシアニン配糖化酵素の解析」を行った。この研究結果よりシロイヌナズナにおいて初めてAAGT活性の検出に成功し、BGLU10がAAGTをコードしていることを示した。また、これまでのAAGTsとは異なりアントシアニン基本骨格への配糖化ではなくアントシアニン基本骨格へ修飾されたアシル基に配糖化を行う新規の基質特異性であることが示された。さらに、今回のクマロイル基への配糖化反応が示されたことにより、これまでの他の知見と合わせてシロイヌナズナにおけるアントシアニン修飾酵素が全て明らかとなった。加えて、AAGTsは花特異的な酵素ではなく、植物種によっては葉においてもアントシアニンの配糖化を触媒する酵素であることが示され、本研究によりAAGTの新たな知見を獲得するに至った。

  • 研究成果

    (4件)

すべて 2013 2012

すべて 雑誌論文 (2件) (うち査読あり 2件) 学会発表 (2件)

  • [雑誌論文] Acyl-glucose-dependent glucosyltransferase catalyzes the final step of an thocyanin formation in Arabidopsis2013

    • 著者名/発表者名
      Taira Miyahara
    • 雑誌名

      Journal of Plant Physiology

    • DOI

      pii:S0176-1617(12)00548-2.10.1016/j.jplph.2012.12.001

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Isolation of an acyl-glucose-dependent anthocyanin 7-0-glucosyltransferase from the monocot Agapanthus africanus2012

    • 著者名/発表者名
      Taira Miyahara
    • 雑誌名

      Journal of Plant Physiology

      巻: 169 ページ: 1321-1326

    • DOI

      10.1016/j.jplph.2012.05.004

    • 査読あり
  • [学会発表] シロイヌナズナにおけるアシルグコース依存型アントシアニン配糖化酵素活性の検出2012

    • 著者名/発表者名
      宮原平
    • 学会等名
      第30回日本植物細胞分子生物学会(生駒)大会
    • 発表場所
      奈良、奈良先端科学技術大学 大学院
    • 年月日
      2012-08-05
  • [学会発表] Isolation of an acyl-glucose-dependent anthocyanin glucosyltransferase from the monocot Agapantus africanus and expression analysis of its homologous genes in Arabidopsis thaliana2012

    • 著者名/発表者名
      Taira Miyahara
    • 学会等名
      XXVth International Conference on Polyphenols
    • 発表場所
      イタリア、フィレンツェ大学
    • 年月日
      2012-07-25

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公開日: 2014-07-16  

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