体細胞の細胞周期とその制御機構

2001 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 12002011
• 研究機関: 九州大学
• 研究代表者: 西本 毅治 九州大学, 大学院・医学研究院, 教授 (10037426)
• 研究分担者: 西嶋 仁 九州大学, 大学院・医学研究院, 特別研究員(PD) ; 西谷 秀男 九州大学, 大学院・医学研究院, 助手 (40253455)
• キーワード: DBX / RCC1 / カフェイン / RanBPM / Gap1 / Gtr1 / RagA / 細胞周期制御

研究概要

(1)BHK21細胞より新たに分離した温度感受性変異株ET24の変異遺伝子、X染色体のDED1類似RNAヘリケース,DBX(Dead Box X isoform)を同定した。(2)温度感受性変異を持つマウスの作成。DAD1:温度感受性DAD1遺伝子をDAD1遺伝子を破壊したES細胞に挿入する段階。RCC1:RCC1遺伝子を破壊したES細胞ができた。(3)Ran GTPaseネットワークの機能。(1)RCC1のGEF活性がカフェインにより阻止されることが判明。(2)分裂酵母より14個の変異部位が相互に異なるRCC1温度感受性変異株を分離した。これらのRCC1変異のサプレッサー遺伝子の分離を進めている。(3)完全長RanBPM(分子量90kDa)をコードするcDNAを分離した。完全長RanBPMは過剰発現により微少管ネットワークを破壊せず、セントロソームに局在しないことからRanBPMが微少管形成に関与すると言う仮説を訂正した。(4)出芽酵母のRan相同体Gsp1pの温度感受性変異株がExosomeによるrRNA processingの段階に欠陥を持つことからRanがExosome活性を制御していることを示唆した。(5)Gsp1の温度感受性変異株がDNA傷害チェックポイントコントロールに欠損があることが判明。(6)RanGTPaseサイクルと拮抗するGtr1/Gtr2サイクル。RagA-GTP型に特異的に結合する蛋白質No.227とrRNAプロセッシングとの相関が明らかとなりつつある。

研究成果

• [文献書誌] H.Nishitani, et al.: "The human licensing factor for DNA replication Cdt1 accumulates in G1 and is destabilized after initiation of S phase"J. Biol. Chem.. 276. 44905-44911 (2001)
• [文献書誌] T.Sekiguchi et al.: "Novel G protein, Rag C and Rag D, interact with GTP-binding proteins, Rag A and Rag B"J. Biol. Chem.. 276. 7246-7257 (2001)
• [文献書誌] H.Nishitani, et al.: "Full-sized RanBPM cDNA encodes a protein possessing a long stretch of proline snd glutamine within the N-terminal region, comprising a large protein complex"GENE. 272. 25-33 (2001)
• [文献書誌] N.Suzuki et al.: "The Saccharomyces carevisiae small GTPase, Gsp1p/Ran, is involved in 3' processing of 7S-to-5.8S rRNA and in degradation of the excised 5'-AO fragment of 35S pre-rRNA, both of which are carried out by the exosome"GENETICS. 158. 613-625 (2001)
• [文献書誌] T.Goda et al.: "The N-terminal helix of Xenopus cyclins A and B contributes to binding specificity of the cyclin-CDK complex"J. Biol. Chem. 276. 15415-15422 (2001)