2000 年度実績報告書

中脳ドーパミンニューロンの発生と生存に関するマウス分子遺伝学的研究

研究課題

研究課題/領域番号	12031219
研究機関	福島県立医科大学
研究代表者	小林和人福島県立医科大学, 医学部, 教授 (90211903)
研究分担者	松下夏樹福島県立医科大学, 医学部, 講師 (40271556)
キーワード	ドーパミン / パーキンソン病 / チロシン水酸化酵素 / 緑色蛍光タンパク質 / 核内受容体 / 条件的遺伝子ターゲティング
研究概要	中脳ドーパミンニューロンの発生と生存の分子機構を明らかにするために、第一に、本ニューロンにおいて緑色蛍光タンパク質(GFP)を発現するトランスジェニックマウスを用いて、ドーパミンニューロンの単離法の開発を試みた。GFP発現トランスジェニックマウスの胎生期中脳より細胞懸濁液を調製し、セルソーターを用いてGFP陽性細胞を回収し、ドーパミンニューロンを濃縮することに成功した。この細胞集団は、細胞表面分子に対するモノクローナル抗体の作製や細胞特異的な遺伝子の単離に有益な研究材料となる。第二に、ドーパミンニューロンに発現する遺伝子のひとつとして、核内受容体Nurr1の機能解析を行なった。本受容体のドーパミンニューロンのマーカー遺伝子であるチロシン水酸化酵素(TH)遺伝子の発現を調節する可能性を検討した。培養細胞を用いた解析により、Nurr1はTH遺伝子の転写を促進することを明らかにし、この活性化に関係する少なくともひとつの応答配列を同定した。第三に、ドーパミンニューロンに発現する遺伝子機能の解析のために、細胞特異的な遺伝子ターゲティング系の開発を試みた。TH遺伝子プロモーターの下流にCre組換え酵素を接続した融合遺伝子を用いて複数のトランスジェニックマウス系統を作製した。レポーターマウスとの交配により遺伝子組換えの組織分布を検討し、ドーパミンニューロンにおいて組換えを誘導するトランスジェニックマウス系統を樹立した。本系統は、今後、ドーパミンニューロンにおける遺伝子機能の解明のために重要な実験系を提供する。

研究成果

(8件)

すべてその他

すべて文献書誌 (8件)

[文献書誌] Kobayashi,K.,and Sano,H: "Dopamine deficiency in mice"Brain Dev.. 22. S54-S60 (2000)
[文献書誌] Kobayashi,K. et al.: "Modest neuropsychological deficits caused by reduced noradrenaline metabolism in mice heterozygous for a mutated tyrosine hydroxylase gene."J.Neurosci.. 20. 2418-2425 (2000)
[文献書誌] Iwawaki,T. et al.: "Identification of a potential Nurr1 response element that activates the tyrosine hydroxylase gene promoter in cultured cells."Biochem.Biophys.Res.Commun.. 274(3). 590-595 (2000)
[文献書誌] Usukura,J. et al.: "Direct imaging of phosphorylation-dependent conformational change and DNA biding of CREB by electron microscopy."Genes to Cells. 5. 515-522 (2000)
[文献書誌] Kobayashi,K.: "Role of catecholamine signaling in brain and nervous system functions : new insights from mouse molecular genetic study."J.Invest.Dermatol.. (in press). (2001)
[文献書誌] Kobayashi,K.and Yasoshima,Y: "The central noradrenaline system and memory consolidation."Neuroscientist. (in press). (2001)
[文献書誌] Kobayashi,K.and Nagatsu,T.: "Progress in Gene Therapy-Basic and Clinical Frontiers-(ed., Bertolotti, R.)"Transgenic rescue of tyrosine hydroxylase-deficient mice : application for generating animal models with catecholamine dystunction.. 556 (2000)
[文献書誌] 小林和人: "ドーパミン最新の話題(永津俊治編),Excerpta Medica"ドーパミン欠損遺伝子変異マウスにおける脳機能障害. 113 (2000)

2000 年度 実績報告書

中脳ドーパミンニューロンの発生と生存に関するマウス分子遺伝学的研究

研究代表者

小林 和人 福島県立医科大学, 医学部, 教授 (90211903)

研究成果

[文献書誌] Kobayashi,K.,and Sano,H: "Dopamine deficiency in mice"Brain Dev.. 22. S54-S60 (2000)

[文献書誌] Kobayashi,K. et al.: "Modest neuropsychological deficits caused by reduced noradrenaline metabolism in mice heterozygous for a mutated tyrosine hydroxylase gene."J.Neurosci.. 20. 2418-2425 (2000)

[文献書誌] Iwawaki,T. et al.: "Identification of a potential Nurr1 response element that activates the tyrosine hydroxylase gene promoter in cultured cells."Biochem.Biophys.Res.Commun.. 274(3). 590-595 (2000)

[文献書誌] Usukura,J. et al.: "Direct imaging of phosphorylation-dependent conformational change and DNA biding of CREB by electron microscopy."Genes to Cells. 5. 515-522 (2000)

[文献書誌] Kobayashi,K.: "Role of catecholamine signaling in brain and nervous system functions : new insights from mouse molecular genetic study."J.Invest.Dermatol.. (in press). (2001)

[文献書誌] Kobayashi,K.and Yasoshima,Y: "The central noradrenaline system and memory consolidation."Neuroscientist. (in press). (2001)

[文献書誌] Kobayashi,K.and Nagatsu,T.: "Progress in Gene Therapy-Basic and Clinical Frontiers-(ed., Bertolotti, R.)"Transgenic rescue of tyrosine hydroxylase-deficient mice : application for generating animal models with catecholamine dystunction.. 556 (2000)

[文献書誌] 小林和人: "ドーパミン最新の話題(永津俊治 編),Excerpta Medica"ドーパミン欠損遺伝子変異マウスにおける脳機能障害. 113 (2000)

2000 年度実績報告書

小林和人福島県立医科大学, 医学部, 教授 (90211903)

[文献書誌] 小林和人: "ドーパミン最新の話題(永津俊治編),Excerpta Medica"ドーパミン欠損遺伝子変異マウスにおける脳機能障害. 113 (2000)