リコンビナントウイルス様中空粒子(VLP)を用いたHIVワクチンの開発

2000 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 12035209
• 研究機関: 三重大学
• 研究代表者: 保富 康弘 三重大学, 医学部, 助教授 (90281724)
• キーワード: HIV / VLF / ワクチン / 粘膜免疫

研究概要

1.リコンビナントVLP:E型肝炎ウイルス(HEV)のウイルス様中空粒子(VLP)に外来遺伝子挿入可能な位置を決定するためにTag(HSV B cell epitope)を用いVLPの形成を検討したところ、4カ所の疎水性領域でTag組み込みVLPが形成されることが示された。このことより挿入可能部位で最もVLP産制の多い部位にHIVenv中和抗体エピトープ(HIV308-322,RIQRGPGRAFVTIGK)を挿入したVLPを作製し、マウスに経口投与したところVLPに対するのと同様に消化管内および血清中にHIVenv特異抗体の産制が認められた。これら抗体は血清中よりも消化管内溶液で高く、消化管内ではIgAが中心であった。
2.DNAワクチン封入VLP:HEV-VLPをHIVenv DNA添加バッファー内でEDTAでCa^<2+>をキレートし、VLPの各分子間を広げその後Ca^<2+>を添加しHIVenv DNAを封入したHIVenvDNA封入VLPを作製した。このHIVenv DNA封入VLPをマウスに経口投与したところ血清中および消化管内溶液中にHIVenv特異的抗体の産制が認められた。さらにHIVenv特異的細胞傷害性Tリンパ球(CTL)が誘導された。HIVenv特異抗体では消化管内溶液中が血清中より高く、CTLも脾細胞より腸間膜リンパ節で高く誘導された。
以上のことよりVLPを用いた2法によるワクチンは全身的のみならず粘膜免疫に強い抗HIV効果をもたらすことが期待された。

研究成果

• [文献書誌] Mori,K.,Yasutomi,Y.,Sawada,S., et al.,: "Short-term treatment with a novel RT inhibitor induces an attenuated vaccine effect able to contain a pathogenic SHIV-RT virus."J.Virol.. 74. 5747-5753 (2000)
• [文献書誌] Seth,A.,Yasutomi,Y.,Jacoby,H., et al.: "Evaluation of a lipopeptide immunogen as a therapeutic in HIV type 1-seropositive individuals."AIDS Res.Hum.Retroviruses.. 16. 337-343 (2000)
• [文献書誌] Kamei,A.,Tamaki,S.,Taniyama,H., et al.,: "Induction of hepatitis C vinus specific cytotoxic T lymphocytes in mice by an intrahepatic inoculation with an expression plasmid."Virology. 273. 120-126 (2000)
• [文献書誌] Matsumoto,J.,Kawai,S.,Terao,K., et al.,: "Malaria infection induces rapid elevation of soluble Fas ligand level in serum and subsequent T lymphocytepenia : possible factors responsible for the differences in susceptibility of two speiceis of Macaca monkeys to Plasmodium coatney-infection."Infect.Immun.. 68. 1183-1186 (2000)
• [文献書誌] Uno-Furuta,S.,Tamaki,S.,Takebe,Y., et al.,: "Inductoin of virus-specific cytotoxic T lymphocytes by in vivo electric administration of peptides."Vaccine. (印刷中).