シナプス膜における受容体/チャネルのクラスタリングと癌抑制タンパクAPC

2000 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 12050221
• 研究機関: 藤田保健衛生大学
• 研究代表者: 千田 隆夫 藤田保健衛生大学, 医学部, 教授 (10187875)
• 研究分担者: 藤本 豊士 名古屋大学, 医学部, 教授 (50115929)
• キーワード: APC / 癌抑制遺伝子 / シナプス / β-カテニン / hDLG / PSD-95 / DAP-1 / postsynaptic density

研究概要

1.APCの発現はマウスの嗅球、海馬、小脳皮質で高かった。
2.免疫電顕法によると、APCはニューロンの細胞体・神経線維・神経終末に広く分布していた。APCはプルキンエ細胞を取り巻く、かご細胞の神経終末叢に濃縮していた。嗅球の僧帽細胞ではAPCは核内にも検出された。
3.中枢神経系全域において、APCは毛細血管の周囲に終わるアストロサイトの終足に局在していた。小脳の顆粒層ではアストロサイトの突起にもAPCの局在が見られた。
4.ニューロンではAPCとβ-カテニン・hDLGが共存していたが、アストロサイトでは共存は見られなかった。
5.APCとシナプス関連タンパクPSD-95、DAP-1の分布・局在を検索した。PSD-95はマウス小脳皮質分子層全体に分布すると共に、プルキンエ細胞体を取り巻く、かご細胞の終末神経叢に濃縮しており、これはAPCの局在と一致した。二重免疫電子顕微鏡によって、分子層のシナプス後部のpostsynaptic densityにおいてAPCとPSD-95及びAPCとDAP-1の共存が認められた。
6.APCとDLGファミリーの結合の意義を知るために、DLGとの結合部位を欠いた変異APC(APC1638)を発現するトランスジェニックマウスを解析した。APC1638のホモ接合体マウスでは、成長遅滞、男性生殖器の発達不良、乳腺のシスト形成、運動失調が見られ、小脳分子層のプルキンエ細胞樹状突起棘のシナプスにおいて、post-synaptic densityの非薄化が認められた。

研究成果

• [文献書誌] Satoh K,Morishita T,Haraguchi K,Kakinuma N,Akiyama T,Senda T: "Expression and localization of the LGN protein in the mouse brain with reference to its relationship with Gαi2"Med Electron Microsc. 32. 221-225 (2000)
• [文献書誌] Kawasaki Y,Senda T, 他6名: "Asef, a link between the tumor suppressor APC and G-protein signaling"Science. 289. 1194-1197 (2000)
• [文献書誌] Fan Q-W,Yu W,Senda T,Yanagisawa K,Michikawa M: "Cholesterol-dependent modulation of tau phosphorylation in cultured neurons"J Neurochem. 76. 391-400 (2001)
• [文献書誌] 千田隆夫: "APC癌抑制遺伝子産物 -その多彩な発現と機能-"日本臨床電子顕微鏡学会誌. 33. 65-74 (2001)
• [文献書誌] Kohu K,Roy BC,Kuroda T,Kakinuma N,Akiyama T,Senda T: "Localization of the novel GAP family protein SPAL in epithelial cells"Acta Histochem Cytochem. (印刷中).
• [文献書誌] Kakinuma N,Nishimura Y,Akiyama T,Senda T: "APC is colocalized with β-catenin and hDLG in the Henle's loop of the mouse kidney"Acta Histochem Cytochem. (印刷中).