2000 年度実績報告書

イムノトキシン細胞標的法を利用した脳情報処理機構の解析

研究課題

研究課題/領域番号	12050234
研究機関	福島県立医科大学
研究代表者	小林和人福島県立医科大学, 医学部, 教授 (90211903)
研究分担者	八十島安伸福島県立医科大学, 医学部, 講師 (00273566) 松下夏樹福島県立医科大学, 医学部, 講師 (40271556)
キーワード	組換え体イムノトキシン / 細胞ターゲティング / 大脳基底核 / 間接経路 / 介在ニューロン / ドーパミン受容体
研究概要	(1)大脳基底核に依存する運動制御機能において間接経路の投射ニューロンの役割を明らかにするために、本ニューロンのマーカーであるドーパミンD2受容体(D2R)を利用して選択的な細胞破壊を試みた。D2R遺伝子にイムノトキシンの標的分子であるインターロイキンー2受容体の遺伝子を導入した変異マウスを作製した。このマウスの線条体にイムノトキシンを投与し、種々のマーカーを利用して、細胞破壊の特異性を評価した。遺伝子変異マウスにおいて、D2Rを発現するエンケファリン陽性の間接性投射ニューロンとアセチルコリン性の介在ニューロンの選択的な破壊が誘導された。一方で、イムノトキシンの投与は、変異マウスのドーパミンニューロンにおいて形態的および生化学的な変化を誘導しなかった。次に、変異マウスの片側の線条体へイムノトキシンを処理することによって誘導される回転行動の変化を調べた。変異マウスでは、定常状態において処理と反対方向への回転が起こり、アポモルフィンやメトアンフェタミンの投与によって処理と同側への回転が誘発された。D1あるいはD2の選択的アゴニスト、および、両者を同時に投与した回転運動の測定から、ドーパミンによる運動促進効果にはD1とD2を介した協調的な制御が必要であり、この制御にD2受容体を発現する線条体ニューロンが必須の役割を持つことが示唆された。 (2)直接性投射細胞および介在細胞の破壊を目的に、ドーパミンD1受容体、パルブアルブミン、ソマトスタチン遺伝子に、インターロイキンー2受容体遺伝子を導入した遺伝子ターゲティングベクターを作製した。これらのベクターを用いて、マウス胚性幹細胞における相同組換え体の単離を試みた。引き続き、相同組換え体細胞を用いて、遺伝子変異マウスの作製を進める。

研究成果

(8件)

すべてその他

すべて文献書誌 (8件)

[文献書誌] Kobayashi,K.,and Sano,H: "Dopamine deficiency in mice"Brain Dev.. 22. S54-S60 (2000)
[文献書誌] Kobayashi,K. et al.: "Modest neuropsychological deficits caused by reduced noradrenaline metabolism in mice heterozygous for a mutated tyrosine hydroxylase gene."J.Neurosci.. 20. 2418-2425 (2000)
[文献書誌] Iwawaki,T. et al.: "Identification of a potential Nurrl response element that activates the tyrosine hydroxylase gene promoter in cultured cells."Biochem.Biophys.Res.Commun.. 274(3). 590-595 (2000)
[文献書誌] Usukura,J. et al.: "Direct imaging of phosphorylation-dependent conformational change and DNA biding of CREB by electron microscopy."Genes to Cells. 5. 515-522 (2000)
[文献書誌] Kobayashi,K.: "Role of catecholamine signaling in brain and nervous system functions : new insights from mouse molecular genetic study."J.Invest.Dermatol.. (in press). (2001)
[文献書誌] Kobayashi,K.and Yasoshima,Y: "The central noradrenaline system and memory consolidation."Neuroscientist. (in press). (2001)
[文献書誌] Kobayashi,K.and Nagatsu,T.: "Progress in Gene Therapy-Basic and Clinical Frontiers-(ed., Bertolotti, R.)"Transgenic rescue of tyrosine hydroxylase-deficient mice : application for generating animal models with catecholamine dystunction.. 556 (2000)
[文献書誌] 小林和人: "ドーパミン最新の話題(永津俊治編),Excerpta Medica"ドーパミン欠損遺伝子変異マウスにおける脳機能障害. 113 (2000)

2000 年度 実績報告書

イムノトキシン細胞標的法を利用した脳情報処理機構の解析

研究代表者

小林 和人 福島県立医科大学, 医学部, 教授 (90211903)

研究成果

[文献書誌] Kobayashi,K.,and Sano,H: "Dopamine deficiency in mice"Brain Dev.. 22. S54-S60 (2000)

[文献書誌] Kobayashi,K. et al.: "Modest neuropsychological deficits caused by reduced noradrenaline metabolism in mice heterozygous for a mutated tyrosine hydroxylase gene."J.Neurosci.. 20. 2418-2425 (2000)

[文献書誌] Iwawaki,T. et al.: "Identification of a potential Nurrl response element that activates the tyrosine hydroxylase gene promoter in cultured cells."Biochem.Biophys.Res.Commun.. 274(3). 590-595 (2000)

[文献書誌] Usukura,J. et al.: "Direct imaging of phosphorylation-dependent conformational change and DNA biding of CREB by electron microscopy."Genes to Cells. 5. 515-522 (2000)

[文献書誌] Kobayashi,K.: "Role of catecholamine signaling in brain and nervous system functions : new insights from mouse molecular genetic study."J.Invest.Dermatol.. (in press). (2001)

[文献書誌] Kobayashi,K.and Yasoshima,Y: "The central noradrenaline system and memory consolidation."Neuroscientist. (in press). (2001)

[文献書誌] Kobayashi,K.and Nagatsu,T.: "Progress in Gene Therapy-Basic and Clinical Frontiers-(ed., Bertolotti, R.)"Transgenic rescue of tyrosine hydroxylase-deficient mice : application for generating animal models with catecholamine dystunction.. 556 (2000)

[文献書誌] 小林和人: "ドーパミン最新の話題(永津俊治 編),Excerpta Medica"ドーパミン欠損遺伝子変異マウスにおける脳機能障害. 113 (2000)

2000 年度実績報告書

小林和人福島県立医科大学, 医学部, 教授 (90211903)

[文献書誌] 小林和人: "ドーパミン最新の話題(永津俊治編),Excerpta Medica"ドーパミン欠損遺伝子変異マウスにおける脳機能障害. 113 (2000)