| 研究概要 |
本研究ではB細胞抗原受容体(BCR)からのシグナルによるB細胞活性化の負の制御の分子機構について解析を行った。(1)未熟B細胞ではBCR刺激によりアポトーシスが生じる。未熟B細胞WEHI231細胞ではBCRシグナルによりアポトーシスが誘導される。その際、新規のタンパクの合成が必須であり、そのタンパクがミトコンドリアを標的とすることを見いだした。この新規タンパクのcDNAを単離し、iWH37と名付けた。iWH37はアポトーシスの際にミトコンドリアに局在し、VDAC, Bakと結合する。iWH37をCos7細胞に強発現すると、ミトコンドリアにiWH37が局在した場合は細胞死が誘導される。WEHI231細胞では、iWH37はBCR刺激により誘導されることから、未熟B細胞の細胞死に関与する新規分子と考えられる。(2)SHP-1を介するBリンパ球活性化の負の制御機構を明らかにする目的で、IgM-BCRを発現するマウスミエローマ細胞J558Lμm3にCD22、CD72などの抑制性共受容体、SHP-1のドミナントネガティブフォームのcDNAを導入した。BCR単独ではSHP-1を活性化できず、抑制性共受容体の存在下でBCR架橋がおこることによりはじめてSHP-1の活性化がおこった。さらに、SHP-1はIgα/Igβそのものやシグナル分子SykやBLNK/SLP-65のリン酸化を負に制御したが、Lynは制御しなかった。Bリンパ球においてSHP-1は抑制性共受容体により活性化され、BCRそのものやその近傍のシグナル分子のリン酸化を負に制御することによりBリンパ球の活性化を負に制御することが明らかとなった。次いでSHP-1活性化が異なるか検討した。Bリンパ球株K46にIgM, IgD, IgGのアイソタイプのBCRを導入したところ、これらすべてのアイソタイプのBCR架橋によってCD72のリン酸化とCD72とSHP-1の会合がおこり、IgM, IgD, IgGのどのアイソタイプによってもSHP-1の活性化がおこることが明らかとなった。
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