ロイコトリエン合成・代謝酵素、ロイコトリエン受容体を介したマスト細胞活性化の機序

2001 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 12139203
• 研究種目: 特定領域研究(B)
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 横溝 岳彦 東京大学, 大学院・医学系研究科, 助教授 (60302840)
• 研究分担者: 魚住 尚紀 東京大学, 大学院・医学系研究科, 日本学術振興会 特別研究員(PD)
• キーワード: ロイコトリエンB4 / BLT1 / BLT2 / G-タンパク質共役型受容体 / クローニング / フォスホリパーゼ / 顆粒放出 / ARDS

研究概要

強力な生理活性脂質であるロイコトリエンの生体内における役割を解明する目的でロイコトリエンB4受容体(BLT2)を欠損するマウスの作成を進めた。マウスBLT2ゲノムを単離し、相同組換えES細胞を作成するためのターゲッテイングベクターを作成し、現在ES細胞の樹立を行っている。またBLT2がLTB4のみならず、多数の不飽和脂肪酸によっても活性化されること、既存のBLT拮抗薬で阻害されないことを見いだし、新規BLT拮抗薬の開発の必要性を示した。(Yokomizo, J. Biol. Chem. 2001)すでに作成したBLT1欠損マウスに関しては、純系化と表現形の解析を行っている。現在までに、LTB4結合能の低下、LTB4による細胞内カルシウム上昇反応の欠除を確認している。
さらにロイコトリエン産生のキーエンザイムである細胞質型フォスホリパーゼA2(cPLA2)欠損マウスを用い、塩酸気道内注入、リポポリサッカライド静脈内注射によるARDSモデルを用いて野性型マウスとの比較を行った。いずれのモデルにおいても、cPLA2欠損マウスは野性型マウスに比較して気道内圧上昇、動脈血酸素飽和度低下、肺胞への炎症細胞の浸潤のいずれにおいても、極めて減弱した反応しか示さず、cPLA2がARDSの進行に重要な役割を果たしていること、また、cPLA2阻害薬が、ARDSの予防・治療薬になりうることを示した。(Nagase, Nature Immunol. 2001)

研究成果

• [文献書誌] Nagase, T., Uozumi, N.他: "Acute lung injury by sepsis and acid aspiration: a key role of cytosolic phospholipase A2"Nature Immunology. 1. 42-46 (2000)
• [文献書誌] Yokomizo, T.他: "Leukotriene B4 : metabolism and signal transduction"Arch. Biochem. Biophys.. 385. 231-241 (2001)
• [文献書誌] Yokomizo, T.他: "Hydroxyeicosanoids bind to and activate the low-affinity leukotriene B4 receptor, BLT2"J. Biol. Chem.. 276. 12454-12459 (2001)
• [文献書誌] Yakomizo, T.他: "Co-expression of two LTB4 receptors in human mononuclear cells"Life Sci.. 68. 2207-2212 (2001)
• [文献書誌] Fukunaga, K., 他: "Single nucleotide polymorphism of human platelet-activating factor receptor impairs G-protein activation"J. Biol. Chem.. 276. 43025-43030 (2001)
• [文献書誌] Yamamoto, T., Yokomizo, T.他: "Immunohistochemical localization of guinea-pig leukotriene B4 12-hydroxydehydrogenase/15-ketoprostaglandin 13-reductase"Eur. J. Biochem.. 368. 6105-6113 (2001)
• [文献書誌] Yokomizo, Tほか4名: "Advences in prostaglandin and leukotriene research. Basic science and new clinical application(部分執筆)"Kluwer academic publishers. 203 (2001)