2000 年度実績報告書

糖尿病関連遺伝子群の解明

研究課題

研究課題/領域番号	12204007
研究種目	特定領域研究(C)
研究機関	愛媛大学
研究代表者	牧野英一愛媛大学, 医学部, 教授 (50009578)
研究分担者	大沼裕愛媛大学, 医学部, 助手 (00294794) 大澤春彦愛媛大学, 医学部, 助教授 (90294800)
キーワード	糖尿病 / 遺伝子 / 疾患感受性 / ハプロタイプ / SNP / PDE / インスリン / 脂肪細胞
研究概要	糖尿病発症予防に必須の感受性DNAマーカーは日本人では現在不明である。そこで本研究は、以下の2つを目的としている。目的1.糖尿病感受性マーカー及び原因遺伝子の同定 1.DNAサンプル:本年度、2型300名、1型250名、非糖尿病対照者300名分を収集した。倫理面は新規発足の愛媛大学医学部倫理委員会にて承認済みである。 2.SNPを用いた候補遺伝子解析 1型については、全糖尿病約5000名中約4%がGAD抗体陽性で、GAD陽性NIDDMの感受性HLAハプロタイプの頻度は正常とIDDMの中間であった。また、2型と対照各100例の全エクソンをシークエンスし、インスリンに4種、インスリン受容体に19種のSNPを見出した。インスリン受容体異常症2例で新たな変異を同定した。一方、脂質代謝に重要なPDE3Bなどの既知のSNPを種々の組み合わせで解析した。いずれも現時点で2型との関連はない。目的2.PDE3B調節因子のクローニング 1.PDE3B活性化制御因子のクローニング PDE3B相互作用蛋白として酵母two-hybrid法によりクローニングし、複数の陽性クローンについてin vitroでの相互作用を検討中である。 2.PDE3Bキナーゼの精製 PDE3B燐酸化の無細胞アッセイ系を改良し至適条件を設定した。また、in vitro機能解析のため3T3-L1脂肪細胞へのアデノウイルスによる遺伝子導入系を確立した。 3.転写調節領域の解析及び転写因子のクローニング肥満インスリン抵抗性マウス脂肪細胞にてPDE3B遺伝子発現が共通して低下し、PPARγリガンドにより改善することを見出した。そこでマウス及びヒトPDE3Bの転写調節領域をクローニングした。マウスについては転写開始点を決定し、プロモーター活性が分化誘導により増強することを見出した。ヒトでは多型の有無をスクリーニング中である。

研究成果

(5件)

すべてその他

すべて文献書誌 (5件)

[文献書誌] Sakurai K.: "Mutations in the hepatocyte nuclear factor-4alpha gene in Japanese with non-insulin-dependent diabetes : a nucleotide substitution in the polypyrimidine tract of intron 1β."Horm Metab Res. 32. 316-320 (2000)
[文献書誌] Wang,J-C.: "Transducin-like enncer of split proteins, the human homologs of drosophila groucho, interact with hepatic nuclear factor 3β."J Biol Chem. 275. 1841-18423 (2000)
[文献書誌] Osawa,H.: "Identification of novel C253Y missense and Y864X nonsense mutations in the insulin receptor gene in type A insulin resistant patients."Clin Genet. (in press). (2001)
[文献書誌] 大澤春彦,大沼裕,長谷川雅昭,牧野英一: "HbA1,HbA1c検査値のみかた改訂2版"中井利昭編、中外医学社東京. 439-442 (2000)
[文献書誌] 大澤春彦,大沼裕,長谷川雅昭,牧野英一: "日本糖尿病療養指導士受験ガイドブック2000.日本糖尿病療養指導士認定機構編"メヂカルビュー社、東京. (2000)

2000 年度 実績報告書

糖尿病関連遺伝子群の解明

研究代表者

牧野 英一 愛媛大学, 医学部, 教授 (50009578)

研究成果

[文献書誌] Sakurai K.: "Mutations in the hepatocyte nuclear factor-4alpha gene in Japanese with non-insulin-dependent diabetes : a nucleotide substitution in the polypyrimidine tract of intron 1β."Horm Metab Res. 32. 316-320 (2000)

[文献書誌] Wang,J-C.: "Transducin-like enncer of split proteins, the human homologs of drosophila groucho, interact with hepatic nuclear factor 3β."J Biol Chem. 275. 1841-18423 (2000)

[文献書誌] Osawa,H.: "Identification of novel C253Y missense and Y864X nonsense mutations in the insulin receptor gene in type A insulin resistant patients."Clin Genet. (in press). (2001)

[文献書誌] 大澤春彦,大沼裕,長谷川雅昭,牧野英一: "HbA1,HbA1c検査値のみかた 改訂2版"中井利昭 編、中外医学社 東京. 439-442 (2000)

[文献書誌] 大澤春彦,大沼裕,長谷川雅昭,牧野英一: "日本糖尿病療養指導士受験ガイドブック2000.日本糖尿病療養指導士認定機構 編"メヂカルビュー社、東京. (2000)

2000 年度実績報告書

牧野英一愛媛大学, 医学部, 教授 (50009578)

[文献書誌] 大澤春彦,大沼裕,長谷川雅昭,牧野英一: "HbA1,HbA1c検査値のみかた改訂2版"中井利昭編、中外医学社東京. 439-442 (2000)

[文献書誌] 大澤春彦,大沼裕,長谷川雅昭,牧野英一: "日本糖尿病療養指導士受験ガイドブック2000.日本糖尿病療養指導士認定機構編"メヂカルビュー社、東京. (2000)