BXH-2マウスとレトロウィルスを用いたマウス骨髄性白血病原因遺伝子の研究

2000 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 12213140
• 研究種目: 特定領域研究(C)
• 研究機関: (財)癌研究会
• 研究代表者: 中村 卓郎 (財)癌研究会, 癌研究所・発がん研究部, 部長 (00180373)
• 研究分担者: 木南 凌 新潟大学, 医学部, 教授 (40133615)
• キーワード: Evi9 / BXH-2マウス / 骨髄性白血病 / NUP98-HOXA9 / 転写調節 / 胸腺リンパ腫 / Rit1 / 分化

研究概要

マウス造血器腫瘍の系を用いて原因遺伝子を同定し発がんにおける意義を検討した。
1)レトロウィルスにより高頻度で急性骨髄性白血病を発症するBXH-2マウスから原因遺伝子の一つとして同定したEvi9の機能を解析した。Evi9蛋白は、9塩基のNF-kB結合配列に類似の標的配列に結合した。Evi9はレチノイン酸による顆粒球分化を阻害するが、U937細胞とHL60細胞をPMAにより刺激すると、マクロファージ分化に伴ってEvi9蛋白は核から細胞質へ移行することが分かった。さらに分化が進むと核内に再度局在が見られ、局在の変化が分化に対して何らかの役割を果たしていると考えられた。
2)NUP98-HOXA9キメラはt(7;11)(p15;p15)転座を有するヒト白血病において形成される。BXH-2マウスとNUP98-HOXA9トランスジェニックマウスを交配すると、N3マウスでは骨髄性白血病の発症までの潜伏期間が有意に短くなり、NUP98-HOXA9がBXH-2マウスの白血病化を促進すること、N3マウスのretroviral integration siteの中にNUP98-HOXA9と協調する遺伝子が存在することが示唆された。
3)マウス胸腺リンパ腫でみられた第676アミノ酸KがTに置換したRit1変異蛋白は細胞質に分布しnull変異となっていた。腫瘍では対側アレルはLOHで消失していた。
4)54のMNU誘発マウス胸腺リンパ腫を対象に、Ikaros、Rit1、K-rasの変異を検索し、変異頻度が放射線誘発リンパ腫のそれと同程度の変異頻度であることを明らかにした。
5)放射線誘発リンパ腫でみられたマウス16番染色体上のLOHピークを含むBAC-contigを作製し、新しいがん抑制遺伝子の候補領域を300kb以内に限定した。

研究成果

• [文献書誌] Nakamura T: "Evi9 encodes a novel zinc finger protein that physically interacts with BCL6, a known human B-cell proto-oncogene product."Mol.Cell.Biol.. 20(9). 3178-3186 (2000)
• [文献書誌] Saiki Y: "Human EVI9, a homologue of the mouse myeloid leukemia gene, is expressed in the hematopoietic progenitors, and down-regulated during myeloid differentiation of HL-60"Genomics. 70(3). 387-391 (2000)
• [文献書誌] Kroon E: "NUP98-HOXA9 expression in hemopoietic stem cells induces chronic and acute myeloid leumkemias in mice."EMBO J.. 20(3). 350-361 (2001)
• [文献書誌] Watanabe T: "Differential chromatin packaging of genomic imprinted regions between expressed and non-expressed alleles."Hum.Mol.Genet.. 9(20). 3029-3035 (2000)
• [文献書誌] Xu H: "Genetic mapping and allelic loss analysis in mouse thymic lymphomas of Hellos and Aiolos belonging to the Ikaros gene family."Jpn.J.Cancer Res.. 92(1). 36-41 (2001)
• [文献書誌] Niwa O: "Untargeted mutation of the maternally derived mouse hypervariable minisatellite allele in F1 mice born to irradiated spermatozoa."Proc.Natl.Acad.Sci.USA.. 98(4). 1705-1710 (2001)