リンパ球性白血病に於けるウィルス蛋白によるセレクチンリガンド合成酵素の転写調節

2000 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 12213166
• 研究機関: 愛知県がんセンター
• 研究代表者: 平岩 望 愛知県がんセンター, 分子病態学部, 主任研究員 (70175553)
• 研究分担者: 神奈木 玲児 愛知県がんセンター, 分子病態学部, 部長 (80161389)
• キーワード: セレクチンリガンド / fucosyltransferase VII / Tax蛋白 / CRE / T-box / One-hybrid法 / CREB / ATF / bZIP

研究概要

我々がクローニングに成功したセレクチンリガンド合成糖転移酵素Fuc-TVII遺伝子がHTLV-1 Tax蛋白により活性化され、enhancer部がLTR21-bpと相同の構造を持つとともに、その機序は、CREB/ATF転写因子を介した経路で更にprotein kinase A非依存性での活性化が可能であることを発見し、機能的相同性も認めた。そこには単に内因性のCRE領域と異なり、Fuc-T.VII遺伝子CRE-like enhancer部にはCREB/ATF転写因子以外に他の因子の関与が考えられた。
そこで今回、CRE-like配列へのGel Shift AssayによりbZIP型転写因子以外に他の因子との相互作用を証明し、次に酵母One-HYbrid法により同部に結合する因子のクローニングを試みたところ、結合蛋白を100以上のクローンとして得ることが出来、シークエンシング等にて解析した。そしてCPEB/ATF転写蛋白因子と既知のTREB因子以外に、新規のT-box型の転写因子(hF7CAF-1と命名)を単離した。
この新規因子のmRNAをNorthern Blot法にて調べたところHTLV-1感染T細胞株や刺激後のJurkat T細胞での発現増大を認めた。そこでhF7CAF-1の発現ベクターを作成し、Jurkatリンパ球でFuc-T VII遺伝子promoterのレポーター活性を測定したところ、約200%活性が上昇した。またTax単独時のレポーター活性上昇がhF7CAF-1併用により更に強まることを発見し、同遺伝子産物がTaxとの協調によるFuc-T VII遺伝子転写を増大することを認めた。このactivatorとしての作用は、CREB/ATF familyの一部の転写因子とも協調して働いていることを見出した。

研究成果

• [文献書誌] Ohmori,K.,Sasaki,K.Kannagi,R. et al.: "P-and E-selectins recognize sialyl 6-sulfo lewis X, the recently identified L-selectin ligand."Biochem.Biophys.Res.Commun.. 278. 90-96 (2000)
• [文献書誌] Kontani,K.,Hiraiwa,N. et al.: "Autologous dendritic cells or cells expressing both B7-1 and MUC1 can rescue tumor-specific cytotoxic T lymphocytes from MUC1-mediared anonrotic cell death."J.Leukoc.Biol.. 68. 225-232 (2000)
• [文献書誌] Izawa,M.,Kumamoto,K.Kannagi,R. et al.: "Expression of sialyl 6-sulfo Lewis X is inversely correlatad with conventional sialyl Lewis X expression in human colorectal cancer"Cancet Res.. 60. 1410-1416 (2000)