細胞の増殖・死を制御する細胞内シグナルの分子機序

2001 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 12215078
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 岡田 雅人 大阪大学, 微生物病研究所, 教授 (10177058)
• 研究分担者: 黒崎 知博 関西医科大学, 肝臓研究所, 教授 (50178125)
• キーワード: 細胞増殖 / 細胞死 / 細胞内シグナル / チロシンキナーゼ / カルシウムシグ / Src / Csk / IP3レセプター

研究概要

細胞の増殖・分化・死を誘導する種々の細胞外因子は、情報受容に伴う細胞内初期反応としてSrc、Syk、Tecファミリーなどの非受容体型チロシンキナーゼの活性化を惹起し、次いでリン酸化シグナルがカルシウムシグナルへと変換されることによって細胞応答が具現すると考えられている。申請者らはこれまでに、非受容体型チロシンキナーゼの活性制御機構の解析(岡田)及びカルシウムシグナルへの変換機構の解析(黒崎)を通して、上記細胞内シグナルの分子機序の解明を目指した研究を進めてきた。本研究では、さらにその全容を明らかにすることを目的として以下の点について解析を行い、以下の成績を得た。1)Src型チロシンキナーゼ(SFK)の機能が、Csk結合膜蛋白質Cbpを介したネガティブフィードバック機構によって制御されることを明らかにした。2)SFKメンバーFynがCbpリン酸化の責任キナーゼであることを明らかにした。3)Cskの立体構造を解析し、その活性発現と制御機構の構造的基盤を明らかにした。4)IP3レセプターのカルシウムセンサー部位を決定することに成功し、その領域が細胞機能に重要な役割を担っていることを示した。5)細胞膜に存在するカルシウムチャンネルTrpがBCR刺激によるカルシウム流入に重要であることの直接証拠を得ることに成功し、TrpチャンネルとIP3レセプターチャンネルに機能的相互作用が存在する可能性を示した。

研究成果

• [文献書誌] Shima, T.: "Interaction of the SH2 domain of Fyn with a cytoskeletal protein, beta-adducin"J.Biol.Chem.. 276. 42233-42240 (2001)
• [文献書誌] Ohtake, H.: "Transmembrane Phosphoprotein Csk-Binding Protein/Phosphoprotein Associated With Glycosphingolipid-Enriched Microdomains as a Negative Feedback Regulator of Mast Cell Signaling Through the Fe[epsilon]RI"J.Immunol.. 168. 2087-2090 (2002)
• [文献書誌] Itoh, K.: "Negative regulation of immune synapse formation by anchoring lipid raft to cytoskeleton through Cbp-EBP50-ERM assembly"J.Immunol.. 168. 541-544 (2002)
• [文献書誌] Ogawa, A.: "Structure of the Carboxy-terminal Src Kinase, Csk"J.Biol.Chem.. (in press). (2002)
• [文献書誌] Watanabe, D.: "Four tyrosine residues in phospholipase C-γ2, identified as Btk-dependent phosphorylation sites, are reqired for B cell antigen receptor-coupled calcium signaling"J.Biol.Chem.. 276. 38595-38601 (2001)
• [文献書誌] Okazaki, T.: "D-1 immunoreceptor inhibits B cell receptor-mediated signaling by recruiting src homology 2-domain-containing tyrosine phosphatase 2 to phosphotyrosine"Proc.Natl.Acad.Sci. U.S.A.. 98. 13866-13871 (2001)