レチノイン酸による白血病細胞の赤血球分化決定機構の解析

2000 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 12215137
• 研究機関: 自治医科大学
• 研究代表者: 小松 則夫 自治医科大学, 医学部, 助教授 (50186798)
• 研究分担者: 内田 美栄 自治医科大学, 医学部, 助手 (80316520) ; 桐戸 敬太 自治医科大学, 医学部, 助手 (90306150)
• キーワード: UT-7 / GM / GATA-1 / ATRA / CBP / DR5 / RARβ

研究概要

【要約】我々は白血病細胞株UT-7/GMが全トランス型レチノイン酸(ATRA)によって赤芽球へと分化することを発見し、その機序を分子レベルで明らかにしようとした。その解析過程で、(1)UT-7/GM細胞へのcotransfection実験からGATA-1がDR5プロモーターの活性を亢進させ、その効果はATRAによってさらに増強すること、(2)1Aを強制発現させ、CBPとGATA-1との結合を阻害すると、GATA-1によるDR5プロモーターの活性はE1Aの用量依存性に抑制され、一方CBPが結合できない変異型E1Aを強制発現させるとDR5プロモーター活性の抑制は解除されたことから、GATA-1によるDR5プロモーターの活性化にはCBPが必須であり、GATA-1がCBPを介してGATA-1/RARa-RXR複合体を形成していることが強く示唆された。さらに本研究によって(3)GATA-1はATRA刺激前からすでにアセチル化されていること、(2)ATRA刺激によってGATA-1はβグロビン遺伝子のプロモーターの活性化を誘導しなかった。この結果からATRAによる赤芽球分化の進行にはGATA-1以外の転写因子が関与している可能性が示唆された。さらに(3)GATA-1のDNA結合領域のうちカルボキシフィンガーがDR5プロモーターの活性化に必須であることがわかった。以上の結果から、GATA-1はRARβ遺伝子のプロモーターに直接結合して転写を促進している可能性が示唆された。

研究成果

• [文献書誌] Kashii,Y.: "A member of forkhead family transcription factor FKHRL 1 is one of the downstream molecule of phosphatidylinositol 3-kinaze-Akt activation pathway in erythropoietin signal transduction."Blood. 96. 941-949 (2000)
• [文献書誌] Tarumoto,T.: "A Case of Bilateral Heel Ulcers Associated with Hydroxyurea Therapy for chronic Myelogenous."Leukemia. 30. 159-162 (2000)
• [文献書誌] Toki,T.: "Functional characterization of the two alternative promoters of human p45 NF-E2 gene."Exp.Hematol.. 28. 1113-1119 (2000)
• [文献書誌] Oda,A.: "Thrombopoietin and Interleukin-2 Induce Association of CRK with STAT5"Biochem.Biophys.Res.Commun.. 278. 299-305 (2000)
• [文献書誌] Uchida,M.: "A functional role of mitogen-activated protein kinaze, Erk1 and Erk2, in the differentiation of a human leukemia cell line UT-7/GM : a possible key factor for cell fate determination toward erythroid and megakaryocytic lineages"Int.Haematol.. 73. 78-83 (2001)
• [文献書誌] Kirito,K.: "Identification of a novel Stat1 and Stat3 recruitment and activation motif within the erythropoietin receptor"Blood. (in press).
• [文献書誌] Tanaka,M.: "Forkhead family transcription factor FKHRL1 is expressed in human megakaryocytes and regulates cell cycling as a downstream molecule of TPO signaling"J.Biol.Chem.. (in press).