ショウジョウバエ新規カス関連遺伝子のヒトホモログ:動態と機能の解析

2000 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 12215168
• 研究機関: 日本女子大学
• 研究代表者: 松影 昭夫 日本女子大学, 理学部, 教授 (90019571)
• 研究分担者: 井上 喜博 京都工芸繊維大学, ショウジョウバエ遺伝資源センター, 講師 (90201938) ; 広瀬 富美子 愛知県がんセンター, 発がん制御研究部, 主任研究員 (60208882)
• キーワード: ショウジョウバエ / 細胞増殖関連遺伝子 / 転写制御 / クロマチン変換因子 / ヒトホモログ

研究概要

1)ショウジョウバエのDNA複製/細胞増殖関連遺伝子の発現に必須な転写調節因子DREFを見出し、これが細胞周期依存転写因子E2Fの遺伝子転写を制御することを証明した。DREFを中心とする情報ネットワークに関与するいくつかの興味ある遺伝子を同定した。DREFのヒトホモログのcDNAを単離し、その結合配列を決定した。ヒトDREFはヒトサイトメガロウイルスの極初期遺伝子US3のサイレンサーエレメントに結合する細胞性因子であることを示唆する実験結果を得た。ヒトDREFと相互作用するいくつかの因子を見い出しており、その中には、クロマチン変換を通じて多くの遺伝子発現を制御しており、「癌抑制遺伝子産物」としても知られているPolycombグループタンパク質やクロマチン構造変換に関わるDNA helicaeなどを見出し、抗体を作成して、培養細胞における相互作用を証明した。
2)OrbitおよびMeteorヒトホモログを得ている。Orbitのヒトホモログは2種類あり、orbit1遺伝子は多くのヒト臓器で9kbのmRNAが検出され、脳、心臓、骨格筋、肝臓、脾臓で比較的発現が高い。同遺伝子は第2染色体の2q14付近に位置する。orbit2遺伝子は多くの臓器で検出できるが、脳、骨格筋でとくに高発現している。これらの組織は増殖とは直接結びつかない組織であるが、いずれも微小管を多く含むので、ヒトタンパクも微小管と関連する機能をもつと推測している。同遺伝子は第3染色体の3q21-23の領域に位置する。この領域は肺、脾臓、卵巣などの癌でLOHが多く報告されている領域なので、それらのがん細胞における染色体数の不安定性とorbit2との関連は興味深い。Orbit1を大腸菌で発現させ、抗体を作成した。

研究成果

• [文献書誌] Inoue,Y.H.: "Orbit.a novel microtubule-associated protein essential for mitosis in Drosophila"J.Cell.Biol.. 149. 153-165 (2000)
• [文献書誌] Kwon,E.J.: "Transcriptional regulation of the Drosophila ras proto-oncogene by D-STAT during development and in immune response"J.Biol.Chem.. 275. 19824-19830 (2000)
• [文献書誌] Nagasawa,K.: "Identification and characterization of human DNA Polymerase β2, a DNA polymerase β-related enzyme"J.Biol.Chem.. 275. 31233-31238 (2000)
• [文献書誌] Mizushina,Y: "Dehydroaltenusin, a mamalian DNA polymerase α inhibitor"J.Biol.Chem.. 275. 33957-33961 (2000)
• [文献書誌] Oshige,M.: "Molecular cloning and expression during development of the Drosophila gene for the catalytic subunit of DNA polymerase ε"Gene. 256. 93-100 (2000)
• [文献書誌] Ohno,K: "Oharacterization of a Drosophila homologue of the human myelodysplasia/myeloid leukemia factor (MLF)"Gene. 260. 133-143 (2000)