2001 年度実績報告書

腫瘍の特異的標的化を目指した遺伝子治療法の開発

研究課題

研究課題/領域番号	12217123
研究機関	札幌医科大学
研究代表者	濱田洋文札幌医科大学, 医学部, 教授 (00189614)
キーワード	アデノウイルス / 遺伝子治療 / ファイバー変異型 / NG2 / 悪性黒色腫 / 口腔癌 / 膀胱癌 / 安全性評価
研究概要	NG2糖タンパクと特異的に結合するTAASGVRSMHの10アミノ酸のペプチド(TAA)をファイバーノブのC末端に持つF40S/TAAの生物活性を検討した。NG2プロテオグリカンの発現はメラノーマ、グリオーマなどの悪性腫瘍とその腫瘍血管に限局することが報告されており、腫瘍標的化のターゲット候補と考え、実験を計画した。NG2を標的とするTAAペプチドモチーフを含んだAdv-F40S/TAAは、NG2を高発現するA375メラノーマやA172グリオーマに高い選択性を示し、これらの腫瘍の標的化に有効であった。一方、NG2の発現の認められない293細胞、正常メラノサイト、正常肝細胞、A549肺癌、DLD-1大腸癌、HLF肝癌、などには、F/wtが高い遺伝子導入効率を示すのと対照的に、F40S/TAAではほとんど遺伝子導入が得られなかった。一方、NG2高発現のA375メラノーマxenograft担癌マウスに、経静脈的にF40S/TAAを投与したところ、このウイルスは肺・心臓・肝・脾臓・腎臓・血液細胞などにはほとんど取り込まれず、A375腫瘍組織に高い集積を示した。レポーター遺伝子を用いた組織染色では、F40S/TAAはA375腫瘍組織全体に拡がっているのではなく、腫瘍の間質、特に腫瘍血管様組織に集積していることが見出された。これらの結果より、NG2を標的とする選択性の高い「がん標的化ウイルスベクター」の作成に成功したと考えられる。一方、インテグリンを標的としたF/RGDウイルスを用いると、悪性黒色腫、口腔領域の扁平上皮癌、膀胱癌などに高い遺伝子導入効率が得られた。現在臨床への応用を目指して各種ベクターを作成し、安全性の評価を進めている。

研究成果

(6件)

すべてその他

すべて文献書誌 (6件)

[文献書誌] Nakamura T, Sato K., Hamada, H.: "Effective gene transfer for human melanomas by integrin-targeted adenoviral vectors. Hum.Gene Ther.13(5):in press,2002"Human Gene Ther.. 13(5)(In press). (2002)
[文献書誌] Yamamoto S., et al., Hamada, H.: "Reduced transduction efficiency of adenoviral vectors expressing human p53 gene by repeated transduction into glioma cells in vitro"Clinical Cancer Res.. (In press). (2002)
[文献書誌] Uchida H, Shinoura N, Kitayama J, Watanabe T, Nagawa H, Hamada, H.: "Caspase-8 gene transduction augments radiation-induced apoptosis in DLD-1 cells. Biochem.Biophys.Res.Commun.in press,2002"Biochem.Biophys.Res.Commun. (In press). (2002)
[文献書誌] Shinoura N, Furitsu T, Asai A, Kirino T, Hamada, H.: "Co-transduction of p27Kip1 strongly augments Fas ligand-and caspase-8-mediated apoptosis in U-373MG glioma cells"Anticancer Res.. 21(5). 3261-3268 (2001)
[文献書誌] Shinoura N, Sakurai S, Asai A, Kirino T, Hamada, H.: "Caspase-9 transduction overrides the resistance mechanism against p53-mediated apoptosis in U-87MG glioma cells"Neurosurgery. 49(1):. 177-86 (2001)
[文献書誌] Shinoura N, Sakurai S, Asai A, Kirino T, Hamada, H.: "Over-expression of APAF-1 and caspase-9 augments radiation-induced apoptosis in U-373MG glioma cells"Int J Cancer. 93(2). 252-61 (2001)

2001 年度 実績報告書

腫瘍の特異的標的化を目指した遺伝子治療法の開発

研究代表者

濱田 洋文 札幌医科大学, 医学部, 教授 (00189614)

研究成果

[文献書誌] Nakamura T, Sato K., Hamada, H.: "Effective gene transfer for human melanomas by integrin-targeted adenoviral vectors. Hum.Gene Ther.13(5):in press,2002"Human Gene Ther.. 13(5)(In press). (2002)

[文献書誌] Yamamoto S., et al., Hamada, H.: "Reduced transduction efficiency of adenoviral vectors expressing human p53 gene by repeated transduction into glioma cells in vitro"Clinical Cancer Res.. (In press). (2002)

[文献書誌] Uchida H, Shinoura N, Kitayama J, Watanabe T, Nagawa H, Hamada, H.: "Caspase-8 gene transduction augments radiation-induced apoptosis in DLD-1 cells. Biochem.Biophys.Res.Commun.in press,2002"Biochem.Biophys.Res.Commun. (In press). (2002)

[文献書誌] Shinoura N, Furitsu T, Asai A, Kirino T, Hamada, H.: "Co-transduction of p27Kip1 strongly augments Fas ligand-and caspase-8-mediated apoptosis in U-373MG glioma cells"Anticancer Res.. 21(5). 3261-3268 (2001)

[文献書誌] Shinoura N, Sakurai S, Asai A, Kirino T, Hamada, H.: "Caspase-9 transduction overrides the resistance mechanism against p53-mediated apoptosis in U-87MG glioma cells"Neurosurgery. 49(1):. 177-86 (2001)

[文献書誌] Shinoura N, Sakurai S, Asai A, Kirino T, Hamada, H.: "Over-expression of APAF-1 and caspase-9 augments radiation-induced apoptosis in U-373MG glioma cells"Int J Cancer. 93(2). 252-61 (2001)

2001 年度実績報告書

濱田洋文札幌医科大学, 医学部, 教授 (00189614)