メラノーマに対する新しい免疫療法の開発

2003 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 12217132
• 研究機関: 慶應義塾大学
• 研究代表者: 河上 裕 慶應義塾大学, 医学部, 教授 (50161287)
• 研究分担者: 桜井 敏晴 慶應義塾大学, 医学部, 助手 (20101933) ; 松崎 ゆり子 慶應義塾大学, 医学部, 助手 (40255435) ; 藤田 知信 慶應義塾大学, 医学部, 助手 (20199334) ; 塚本 真 慶應義塾大学, 医学部, 助手 (50365441)
• キーワード: メラノーマ / 腫瘍抗原 / DNAチップ / SAGE / DNAクローニング / SEREX / 樹状細胞 / 免疫療法

研究概要

本年度は、網羅的遺伝子発現解析技術として、cDNAチップを用いて、色素細胞とメラノーマに特異的に発現する新規分子として、FCRL/FREBとKU-MEL2を、また、SAGE法を用いてPAX3とM172を同定した。それぞれ大腸菌組み換え蛋白を作製し、Western blot法でメラノーマ患者血清中のIgG抗体の反応性により免疫原性を検討したところ、FCRLとPAX3では血清IgG抗体が検出され、メラノーマ抗原となることが証明された。さらに、メラノーマ患者で検出できる癌精巣抗原の単離を3種類の手法を用いて試みた。DNAチップ解析により、癌精巣抗原様発現を示し胃癌に高発現する分子として同定したKU-CT3は、メラノーマにも高頻度に発現が認められ、患者血清にIgG抗体が検出された。RDA法を用いて精巣選択的に発現する分子を濃縮したmRNAの中から、癌精巣抗原様発現を示すKU-CT4を同定したところ、メラノーマ患者血清中にIgG抗体が検出された。また、自己腫瘍細胞凍結融解物で感作した樹状細胞を用いた免疫療法後の患者血清を用いて、正常精巣cDNAライブラリーをSEREX法でスクリーニングしたところ、癌精巣抗原CAGEが単離された。CAGEはメラノーマ患者だけでなく、子宮体癌患者でも血清IgG抗体が検出された。これらの各種手法を用いて同定した色素細胞特異的抗原と癌精巣抗原という2種類のメラノーマ抗原は、メラノーマに発現するが正常組織での発現は限定され、さらにメラノーマ患者で免疫原性が認められるので、メラノーマの診断やT細胞の標的抗原として免疫療法に応用できる可能性がある。

研究成果

• [文献書誌] Ito K., Kawakami Y., et al.: "Identification of novel bladder cancer antigen, human lipoic acid synthetase, recoginized by antibodis in serum of a patient with metastatic bladder cancer."Int.J.Cancer.. 108. 712-724 (2004)
• [文献書誌] Ueda R., Kawakami Y., et al.: "Identification of a human glioma antigen, SOX6, recognized by patients' sera."Oncogene.. 22. 8823-8834 (2004)
• [文献書誌] Iizuka Y., Kawakami Y., et al.: "Multiple in situ cancer vaccinations with herpes simplex virus and IL-12 synergize to facilitate tumor regression."J Immunother.. 27. 92-98 (2004)
• [文献書誌] Nagayama H., Kawakami Y., et al.: "Aberrant development of monocvyte-derived dendritic obtained from advanced melanoma patients : Results of phase I clinical trail of immunotherapy with tumor lysate-pulsed monocyte-derived dendritic cells plus IL2 for stage IV malignant melanoma patients."Melanoma Res.. 13. 521-530 (2003)
• [文献書誌] Ishikawa T., Kawakami Y., et al.: "Tumor-specific Immunological Recognition of Frameshift-mutated Peptidesan Colon Cancer with Microsatellite Instability."Cancer Res.. 63. 5564-5572 (2003)
• [文献書誌] Kawakami Y.: "Identification of Human Tumor Antigens Recognized by T-cells and Their Use for Immunotherapy."Int.J.Hematol.. 77. 427-434 (2003)
• [文献書誌] Matsushita M., Kawakami Y., et al.: "Molecular Diagnosis of Cancer"Humana press. (in press). (2004)