HIVベクターの開発

2003 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 12217142
• 研究機関: 日本医科大学
• 研究代表者: 島田 隆 日本医科大学, 大学院・医学研究科, 教授 (20125074)
• 研究分担者: 塙 秀樹 日本医科大学, 医学部, 助手 (10256977)
• キーワード: 遺伝子治療 / HIVベクター / 血管新生阻害 / エンドスタチン / アンギオスタチン / 白血病

研究概要

HIVベクターの開発と遺伝子治療への応用を検討している。
1)HIVベクターの改良:フランスで行われた免疫不全症の遺伝子治療により白血病が発生した報告を受け、挿入変異が起こりにくいHIVベクターの開発を進めている。HIVベクターが挿入した部位もしくは近傍の遺伝子を活性化する可能性を検討するアッセイ系を確立した。外部プロモーター活性を検出するためTat遺伝子cDNAをベクターの内部プロモーター上流に挿入し、その発現をHeLa-PUR細胞株で検出した。この系を用い挿入部位上流からのプロモーター活性を測定することが可能であることが確認された。次に、内部プロモーターのエンハンサーを削除、もしくはベクターのLTRへのインシュレーターを挿入したところその頻度が減少することが見出された。
2)HIVベクターを利用した遺伝子治療法の開発:HIVのレセプター分子(CXCR4)に対するアンチセンス発現HIVベクターを導入したTリンパ球はHIVの感染を有意に抑制できることを示した。HSV-TK自殺遺伝子を組み込んだHIVがATL細胞に特異的に遺伝子導入して細胞死を誘導できることを示した。細胞特異性のないVSV-Gエンベロープを持ち血管新生抑制作用のあるendostatinをもつHIVベクター(HIV-End)を作製し癌の遺伝子治療での有用性を検討した。SCIDマウスに移植したEB陽性ヒトリンパ腫細胞の増殖が筋肉内に投与したHIV-Endにより著明に抑制され、生存曲線の改善も認められた。同様にSCIDマウスに移植された多発性骨髄腫細胞の増殖が造血幹細胞に導入したHIV-Endにより著明に抑制されることが明らかになった。

研究成果

• [文献書誌] Okino, T., et al.: "Sequential hitopathological changes in vivo after suicide gene therapy of gastric cancer induced by N-methyl-N'-nitro-N-nitroguanidine in rats."Jpn.J.Cancer Res.. 92. 673-679 (2001)
• [文献書誌] Inokuchi, K., et al.: "Loss of DCC gene expression is of prognostic importance in acute myelogenous leukemia."Clinical Cancer Res.. 8. 1882-1888 (2002)
• [文献書誌] Igarashi, T., et al.: "New strategy for in vivo transgene expression in corneal epithelial progenitor cells."Current Eye Res.. 24. 46-50 (2002)
• [文献書誌] Igarashi, T., et al.: "Lentivirus-mediated expression of angiostatin efficiently inhibits neovascularization in a murine proliferative retinopathy model."Gene Ther.. 10. 219-226 (2003)
• [文献書誌] Inokuchi, K., et al.: "Myeloproliferative disease in transgenic mice expressing P230 Bcr/Able : longer disease latency, thrombocytosis and mild leukocytosis."Blood. 102. 320-322 (2003)
• [文献書誌] Watanabe, A., et al.: "Near-triploidy and niar-tetraploidy in hematological malignancies and mutation of the p53 gene."Clin.Lab.Haem.. 26. 25-30 (2004)