マウスTL抗原を標的とした免疫療法モデルの開発

2001 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 12217170
• 研究機関: 愛知県がんセンター
• 研究代表者: 高橋 利忠 愛知県がんセンター, 所長 (00124529)
• 研究分担者: 赤塚 美樹 愛知県がんセンター, 腫瘍免疫学部, 主任研究員 (70333391) ; 辻村 邦夫 愛知県がんセンター, 腫瘍免疫学部, 主任研究員 (10227407)
• キーワード: マウスTL抗原 / 細胞傷害性T細胞 / テトラマー / 腸上皮間リンパ球 / 胸腺細胞 / CD8 / 細胞傷害性T細胞前駆細胞

研究概要

(1)昆虫細胞に遺伝子導入し、発現させたTL分子を用いてテトラマーを調製した。本TLテトラマーはTL抗原特異的細胞傷害性T細胞(CTL)をT細胞レセプター(TCR)/CD3依存性に染色し、本CTL群をin vitroで濃縮可能であることを示した。
(2)本テトラマーを用いて各種正常組織由来のTリンパ球を染色した所、脾臓や末梢リンパ節由来のCD8陽性リンパ球はほとんど染色されなかったが、予想に反してCD8陽性の腸上皮間リンパ球(iIEL)と胸腺細胞が染色された。この染色はCD8分子依存性で、TCR/CD3非依存性であり、その反応機序として、(i)CD8との直接反応、または(ii)CD8とTLリガンド分子の共役反応の2つの可能性が示唆された。
(3)TL抗原特異的CTL前駆細胞数をより正確に測定するために、CD8非結合性テトラマーの作成を試みた。CD8結合部位に変異を入れたTL分子(T3^b-A245V)を用い、テトラマーを作成し、その結果iIELや胸腺細胞とは反応しないTLテトラマーを得た。

研究成果

• [文献書誌] Tsujimura, K.: "The binding of thymus leukemia(TL) antigen tetramers to normal intestinal intraepithelial lymphocytes and thymocytes"J.Immunol.. 167. 759-764 (2001)
• [文献書誌] Aoki, H.: "Dendritic cells pulsed with tumor extract-cationic liposome complex increase the induction of cytotoxic T lymphocytes in mouse brain tumor"Cancer Immunol. Immunother.. 50. 463-468 (2001)
• [文献書誌] Pei, J.: "Generation of HLA-C-specific cytotoxic T cells in association with marrow graft rejection : analysis of alloimmunity by T-cell cloning and testing of T-cell-receptor rearrangements"Biol Blood Marrow Transplant.. 7. 378-383 (2001)
• [文献書誌] Akatsuka, Y.: "Determination of intronic sequences adjacent to an exon using polymerase chain reaction and genomic DNA library constructed by TA cloning"Anal Biochem.. 289. 289-292 (2001)
• [文献書誌] Brickner, A.G.: "The immunogenicity of a new human minor histocompatibility antigen results from differential antigen processing"J. Exp. Med.. 193. 195-206 (2001)
• [文献書誌] Yazaki, M.: "Generation of HLA-Cw specific cytotoxic T-lymphocytes from cord blood used for cord blood stem cell transplantation"Brit. J. Haematol.. (In press).