2000 年度実績報告書

温熱で誘導される分子シャペロンを利用したがん治療の開発

研究課題

研究課題/領域番号	12217171
研究種目	特定領域研究(C)
研究機関	愛知県がんセンター
研究代表者	大塚健三愛知県がんセンター, 腫瘍免疫学部, 室長 (40150213)
研究分担者	中村普武愛知県がんセンター, 腫瘍ウィルス学部, 室長 (30109938)
キーワード	分子シャペロン / Hsp70 / Hsp40 / HSF1 / 温度感受性変異蛋白質 / 遺伝病治療
研究概要	がんや脳疾患などの後天的な病気、および先天的な遺伝病の多くは、重要な機能を持つ蛋白質の点突然変異や部分的欠失で起こる遺伝子病といえる。これらの変異によってその蛋白質は正しく折れたたまれなくなり、機能が低下したり異常な凝集体を形成するようになることで病気が発症する。分子シャペロンは蛋白質の正しい折りたたみに必須の機能を持つ。最近、変異蛋白質であっても分子シャペロンが過剰に存在すると正常に機能するようになることがわかってきた。分子シャペロンが変異蛋白質の機能を回復させることができるかどうかを検討するために、点突然変異により温度感受性(39℃では増殖不能)になった細胞(tsTM4)に分子シャペロンを導入した。この温度感受性細胞株で、RNA polymerase II largest subunitに点突然変異をもっている。これまで調べたかぎりでは、分子シャペロン単独(Hsp90、Hsp70、Hsp40、Hsdj)、または2つの組み合わせ(Hsp90+Hsp70、Hsp70+Hsp40、Hsp70+Hsdj)を高発現しても、39℃で増殖できる細胞は得られなかった。また、分子シャペロンを誘導するといわれているGGA(geranylgeranyl acetone)存在下でも得られなかった。しかしながら、熱ショック転写因子、HSF1、を構成的に活性型に改変したコンストラクト(△RD-HSF1)を導入したところ、39℃で増殖できる細胞が出現してきた。これから23のクローン細胞株を得た。ほとんどのクローンでは、多くの熱ショック蛋白質(Hsp105,Grp94,Hsp60,Hsp47,Hsp40,Hsdj,Hsp28など)が高発現していた。また、RNA polymerasc II largest subunitの点突然変異についてはすべて変異型であった。今回のわれわれ結果はこのような変異蛋白質であっても正しい折りたたみを促進し正常に機能できるようにすることができることを示唆している。分子シャペロンはまさにguardians of proteinsと言えるかもしれない。

研究成果

(7件)

すべてその他

すべて文献書誌 (7件)

[文献書誌] Ohtsuka,K.: "Roles of molecular chaperones in the nervous system."Brain Res.Bull.. 53. 141-146 (2000)
[文献書誌] Ohtsuka,K.: "Identification of Mrj, a DnaJ/Heat shock protein 40 family protein, as a keratin 8/18 filament-regulatory prolein."J.Biol.Chem.. 275. 34521-34527 (2000)
[文献書誌] Ohtsuka,K.: "Mammalian HSP40/DNAJ homologs : Cloning of novel cDNAs and a proposal for their classification and nomenclature."Cell Stress & Chaperones. 5. 98-112 (2000)
[文献書誌] Ohtsuka,K.: "Chaperones, Hsp70 and Hsp40, suppress aggregate formation and apoptosis in cultured neuronal cells expressing truncated androgen receptor protein with expanded polyglutamine tract."J.Biol.Chem.. 275. 8772-8778 (2000)
[文献書誌] Ohtsuka,K.: "Cloning and expression of murine Hsp40 gene : Differences in initiation sites between heat-induced and constitutive transcript."DNA Seq.. 11. 213-223 (2000)
[文献書誌] Ohtsuka,K.: "Molecular chaperone function of mammalian Hsp70 and Hsp40-A review."Int.J.Hyperthermia. 16. 231-245 (2000)
[文献書誌] Ohtsuka,K.: "Thermotherapy for Neoplasia, Inflammation, and Pain"Kosaka,M.,Sugahara,T.,Schmidt,K.L.and Simon,E.(Eds). 550 (2000)

2000 年度 実績報告書

温熱で誘導される分子シャペロンを利用したがん治療の開発

研究代表者

大塚 健三 愛知県がんセンター, 腫瘍免疫学部, 室長 (40150213)

研究成果

[文献書誌] Ohtsuka,K.: "Roles of molecular chaperones in the nervous system."Brain Res.Bull.. 53. 141-146 (2000)

[文献書誌] Ohtsuka,K.: "Identification of Mrj, a DnaJ/Heat shock protein 40 family protein, as a keratin 8/18 filament-regulatory prolein."J.Biol.Chem.. 275. 34521-34527 (2000)

[文献書誌] Ohtsuka,K.: "Mammalian HSP40/DNAJ homologs : Cloning of novel cDNAs and a proposal for their classification and nomenclature."Cell Stress & Chaperones. 5. 98-112 (2000)

[文献書誌] Ohtsuka,K.: "Chaperones, Hsp70 and Hsp40, suppress aggregate formation and apoptosis in cultured neuronal cells expressing truncated androgen receptor protein with expanded polyglutamine tract."J.Biol.Chem.. 275. 8772-8778 (2000)

[文献書誌] Ohtsuka,K.: "Cloning and expression of murine Hsp40 gene : Differences in initiation sites between heat-induced and constitutive transcript."DNA Seq.. 11. 213-223 (2000)

[文献書誌] Ohtsuka,K.: "Molecular chaperone function of mammalian Hsp70 and Hsp40-A review."Int.J.Hyperthermia. 16. 231-245 (2000)

[文献書誌] Ohtsuka,K.: "Thermotherapy for Neoplasia, Inflammation, and Pain"Kosaka,M.,Sugahara,T.,Schmidt,K.L.and Simon,E.(Eds). 550 (2000)

2000 年度実績報告書

大塚健三愛知県がんセンター, 腫瘍免疫学部, 室長 (40150213)