2000 年度実績報告書

核内レセプター転写制御の分子メカニズムの解明

研究課題

研究課題/領域番号	12219206
研究種目	特定領域研究(C)
研究機関	東京大学
研究代表者	加藤茂明東京大学, 分子細胞生物学研究所, 教授 (60204468)
キーワード	性ホルモン非依存性生殖器癌 / ノックアラトマウス / 核内レセプタークロストーク / 女性ホルモンレセプター(ERα) / MAPキナーゼ / 性ステロイドレセプター種 / 転写共役因子複合体 / クロマチン構造
研究概要	本研究では転写共役因子群の性状、変異を解析し、性ホルモン非依存性生殖器癌発症の分子メカニズムを探ることを目的に、以下の2点に焦点を当て、核内レセプターの転写促進領域や転写共役因子群の基本的な性状を明らかにするとともに、ノックアウトマウスを用いた生体内高次機能の解明を試みた。 1.膜レセプターからのシグナルとの核内レセプタークロストークの解明:我々は既に女性ホルモンレセプター(ERα)のタンパクN末端が、MAPキナーゼによりリン酸化されることで転写促進能が亢進されることを見出し、このリン酸化依存的に結合する転写共役因子を同定した。このようにN末端側の転写促進能がレセプターの機能調節に極めて重要な役割を果たすことがわかっているものの、その調節機能は不明であるため、特にリン酸化、アルカリ化などのタンパク修飾の側面から探った。 2.ホルモン活性を規定するレセプター共役因子の同定:転写共役因子は複合体として存在することが証明されている。これら複合体はC末端の転写促進領域に結合することは判明しているが、N末端への関与は不明である。そこで性ステロイドレセプター種[ERα、ERβ、アンドロゲンレセプター(AR)]固有かつN末端に結合する共役因子の検索・同定を、酵母two-hybrid法を用いたcDNAスクリーニング法を用いて行った。また、核抽出液を用いたin vitro転写系により転写共役因子複合体の同定を試みた。この時、第一には転写を促進する因子群の同定を目指したが、同時にクロマチン構造を制御する因子や、細胞周期を制御する因子などの同定も試みた。

研究成果

(6件)

すべてその他

すべて文献書誌 (6件)

[文献書誌] Watanabe,M.,Yanagisawa,J.,Kato,S., et al.: "A subfamily of RNA binding DEAD-box proteins acts as an estrogen receptor α co-activator through the N-terminal activation domain (AF-1) with an RNA coactivator, SRA."EMBO J.. 20. (2001)
[文献書誌] Li,M.,Indra,A.,Kato,S., et al.: "Skin abnormalities generated by temporally-controlled RXRα mutations in adult mouse epidermis."Nature. 407. 633-636 (2000)
[文献書誌] Kodera,Y.,Takeyama,K.,Kato,S., et al.: "Ligand-type specific interactions of peroxisome proliferactor-activated receptor gamma with transcriptional coactivators"J.Biol.Chem.. 275. 33201-33204 (2000)
[文献書誌] Kobayashi,Y.,Yanagisawa,J.,Kato,S., et al.: "p300 Mediates functional synergism between AF-1 and AF-2 of estrogen receptor α and β by interacting directly with the N-terminal A/B domains."J.Biol., Chem.. 275. 15645-15651 (2000)
[文献書誌] Fuse,H.,Kitagawa,H.,Kato.S.: "Characterization of transactivational property and coactivator mediation of rat mineralocorticoid receptor AF-1."Mol.Endocrinol.. 14. 889-899 (2000)
[文献書誌] Tai,H.,Kubota,N.,Kato,S.: "In volvement of nuclear receptor coactivator SRC-1 in estrogen-dependent cell growth of MCF-7 cells."Biochem.Biophys.Res.Commun.. 267. 311-316 (2000)

2000 年度 実績報告書

核内レセプター転写制御の分子メカニズムの解明

研究代表者

加藤 茂明 東京大学, 分子細胞生物学研究所, 教授 (60204468)

研究成果

[文献書誌] Watanabe,M.,Yanagisawa,J.,Kato,S., et al.: "A subfamily of RNA binding DEAD-box proteins acts as an estrogen receptor α co-activator through the N-terminal activation domain (AF-1) with an RNA coactivator, SRA."EMBO J.. 20. (2001)

[文献書誌] Li,M.,Indra,A.,Kato,S., et al.: "Skin abnormalities generated by temporally-controlled RXRα mutations in adult mouse epidermis."Nature. 407. 633-636 (2000)

[文献書誌] Kodera,Y.,Takeyama,K.,Kato,S., et al.: "Ligand-type specific interactions of peroxisome proliferactor-activated receptor gamma with transcriptional coactivators"J.Biol.Chem.. 275. 33201-33204 (2000)

[文献書誌] Kobayashi,Y.,Yanagisawa,J.,Kato,S., et al.: "p300 Mediates functional synergism between AF-1 and AF-2 of estrogen receptor α and β by interacting directly with the N-terminal A/B domains."J.Biol., Chem.. 275. 15645-15651 (2000)

[文献書誌] Fuse,H.,Kitagawa,H.,Kato.S.: "Characterization of transactivational property and coactivator mediation of rat mineralocorticoid receptor AF-1."Mol.Endocrinol.. 14. 889-899 (2000)

[文献書誌] Tai,H.,Kubota,N.,Kato,S.: "In volvement of nuclear receptor coactivator SRC-1 in estrogen-dependent cell growth of MCF-7 cells."Biochem.Biophys.Res.Commun.. 267. 311-316 (2000)

2000 年度実績報告書

加藤茂明東京大学, 分子細胞生物学研究所, 教授 (60204468)