核内レセプター転写制御の分子メカニズムの解明

2002 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 12219206
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 加藤 茂明 東京大学, 分子細胞生物学研究所, 教授 (60204468)
• 研究分担者: 北川 浩史 東京大学, 分子細胞生物学研究所, 助手 (20345234) ; 武山 健一 東京大学, 分子細胞生物学研究所, 助手 (30323570)
• キーワード: リガンド誘導性転写制御因子 / 性ホルモン非依存性生殖器癌発症 / SRC-1、TIF2遺伝子 / 酵母two-hybrid法 / cDNAスクリーニング法 / in vitro転写系 / 性ステロイドホルモン応答性 / TRRAP / GCN5転写共役因子複合体

研究概要

ステロイドホルモンレセプターはリガンド誘導性転写制御因子であり、標的遺伝子群の発現を転写レベルで制御する。本研究では転写共役因子群の性状、変異を解析し、性ホルモン非依存性生殖器癌発症の分子メカニズムを探ることを目的として、以下の2点に焦点を当て、研究を進めた。
1.ホルモン活性を規定するレセプター共役因子の同定:転写共役因子は複合体として存在することが証明されている。これら複合体はC末端の転写促進領域に結合することは判明しているが、N末端への関与は不明である。そこで性ステロイドレセプター種[ERα,ERβ,アンドロゲンレセプター(AR)]固有かつN末端に結合する共役因子の検索・同定を、酵母two-hybrid法を用いたcDNAスクリーニング法を用いて行った。また、核抽出液を用いたin vitro転写系により転写共役因子複合体の同定を試みたが、この時、第一には転写を促進する因子群の同定を目指し、同時にクロマチン構造を制御する因子や、細胞周期を制御する因子などの同定も試みた。特に最近同定したTRRAP/GCN5転写共役因子複合体と核内レセプターとの関連を解析した。
2.生体内における転写共役因子の高次機能:転写共役因子の機能異常もしくは量的な制御により、細胞増殖・分化における性ステロイドホルモン応答性が変わる可能性が考えられる。この点を明確にする目的で、転写共役因子のノックアウトマウスを作出した。我々は既に、性ステロイドホルモンレセプターに作用することが証明されている転写共役因子SRC-1、TIF2遺伝子の時期組織特異的遺伝子欠損マウスを作成しており、また1.で同定した因子についても順次ノックアウトマウスを作出しているところである。

研究成果

• [文献書誌] Suzawa, M., Takada, I., Kato S., et al.: "Iinhibition of adipogenesis by cytokines with suppression PPARγ function through the TAK1/TAB1-NIK mediated cascade"Nature Cell Biol.. 5. 224-230 (2003)
• [文献書誌] Nakamichi, Y., Shukunami, C., Kato S., et al.: "Chondromodulin-I (ChM-I) is a bone remodeling factor"Mol. Cell. Biol.. 23. 636-644 (2003)
• [文献書誌] Sato, T., Matsumoto, T., Kato S., et al.: "Late onset of obesity in male androgen receptor-deficient (ARKO) mice"Biochem. Biophys. Res. Commun.. 300. 167-171 (2003)
• [文献書誌] Yanagisawa, J., Kitagawa, H., Kato, S., et al.: "Nuclear receptor function requires a TFTc-type histone acetyl transferase complex"Mol. Cell. 9. 553-562 (2002)
• [文献書誌] Takeyama, K., Ito, S., et al.: "Androgen-dependent neurodegeneration by potyglutamine-expanded human androgen receptor in drosophila"Neuron. 35. 855-864 (2002)
• [文献書誌] Kitagawa, H., Yanagisawa, J., Kato S., et al.: "Ligand selective potentiation of rat mineralocorticoid receptor activation function-1 (AF-1) by a CBP-containing HAT complex"Mol. Cell. Biol.. 22. 3698-3706 (2002)