2001 年度実績報告書

TGF-βシグナルの分子機構とヒトがんにおける異常

研究課題

研究課題/領域番号	12219217
研究機関	東京大学
研究代表者	宮園浩平東京大学, 大学院・医学系研究科, 教授 (90209908)
研究分担者	加藤光保 (財)癌研究会, 癌研究所生化学部, 主任研究員 (20194855) 渡部徹郎東京大学, 大学院・医学系研究科, 助手 (00334235) 宮澤恵二東京大学, 大学院・医学系研究科, 助教授 (40209896)
キーワード	TGF-β / ユビチキン化 / c-myc / 受容体 / Smad / Smurf1
研究概要	1.Smad7のNドメインのMH2領域との結合と抑制作用 TGF-βシグナルの抑制にSmad7のどの領域が重要かを明らかにするために、我々はSmad7のN末端部(Nドメイン)とMH2領域の作用を調べた。MH2領域だけでは弱い抑制作用しか見られなかったのに対し、NドメインをMH2領域とともに遺伝子導入すると、full-lengthのSmad7と同様にTGF-βの作用を強く抑制した。これはNドメインがMH2領域と強く結合することによるものであることが確認された。 2.Smurf1によるSmad7の細胞膜への局在と抑制作用の増強我々はE3リガーゼであるSmurf1がSmad7を細胞質へ移行させたのち、TGF-βレセプターを分解するために細胞膜へ局在させるメカニズムについて調べた。Smurf1はアミノ末端近傍にC2ドメインを持つが、C2ドメインを欠損したSmurf1ΔC2は野生型のSmurf1と同様にSmad7と結合し、核内から細胞質へと移行した。しかしSmurf1ΔC2は細胞膜へ移行することができず、TGF-βレセプターと結合することができなかった。以上から、Smurf1が細胞膜へ局在するにはC2ドメインが重要な役割を果たしており、この領域がTGF-βシグナルの抑制にも重要であることが明らかとなった。 3.Smadを介するc-mycの転写抑制のメカニズム TGF-βは、c-mycの発現を抑制しp15やp21の発現を誘導する。我々はSmad3が、ヒトc-mycプロモーター内で少なくとも3カ所に結合しうることを見出し、このうち1カ所(TIE/E2Fサイト)が、TGF-βによる転写抑制に必要であることを示した。TGF-β刺激後1時間以内にSmad3はTIE/E2Fサイトに結合し、その結果E2F-4とp300の結合がはずれることによって転写活性が抑制されることが明らかとなった。

研究成果

(6件)

すべてその他

すべて文献書誌 (6件)

[文献書誌] Ebisawa, T., et al.: "Smurf1 interacts with transforming growth factor-β type I receptor through Smad7 and induces receptor degradation"J. Biol. Chem.. 276・16. 12477-12480 (2001)
[文献書誌] Fukuchi, M., et al.: "Ligand-dependent degradation of Smad3 by a ubiquitin ligase complex of ROC1 and associated proteins"Mol. Biol. Cell. 12.5. 1431-1443 (2001)
[文献書誌] Akiyoshi, S., et al.: "Targets of transcriptional regulation of transforming growth factor-β : Expression profile analysis using oligonucleotide arrays"Jpn. J. Cancer Res.. 92・3. 257-268 (2001)
[文献書誌] Furuhashi, M., et al.: "Axin facilitates Smad3 activation in the transforming growth factor-β signaling pathway"Mol. Cell. Biol.. 21・15. 5132-5141 (2001)
[文献書誌] Hanyu, A., et al.: "The N-domain of Smad7 is essential for specific inhibition of transforming growth factor-β signaling"J. Cell Biol.. 155・6. 1017-1028 (2001)
[文献書誌] Yagi, K., et al.: "c-myc is a downstream target of Smad pathway"J. Biol. Chem.. 277・1. 854-861 (2002)

2001 年度 実績報告書

TGF-βシグナルの分子機構とヒトがんにおける異常

研究代表者

宮園 浩平 東京大学, 大学院・医学系研究科, 教授 (90209908)

研究成果

[文献書誌] Ebisawa, T., et al.: "Smurf1 interacts with transforming growth factor-β type I receptor through Smad7 and induces receptor degradation"J. Biol. Chem.. 276・16. 12477-12480 (2001)

[文献書誌] Fukuchi, M., et al.: "Ligand-dependent degradation of Smad3 by a ubiquitin ligase complex of ROC1 and associated proteins"Mol. Biol. Cell. 12.5. 1431-1443 (2001)

[文献書誌] Akiyoshi, S., et al.: "Targets of transcriptional regulation of transforming growth factor-β : Expression profile analysis using oligonucleotide arrays"Jpn. J. Cancer Res.. 92・3. 257-268 (2001)

[文献書誌] Furuhashi, M., et al.: "Axin facilitates Smad3 activation in the transforming growth factor-β signaling pathway"Mol. Cell. Biol.. 21・15. 5132-5141 (2001)

[文献書誌] Hanyu, A., et al.: "The N-domain of Smad7 is essential for specific inhibition of transforming growth factor-β signaling"J. Cell Biol.. 155・6. 1017-1028 (2001)

[文献書誌] Yagi, K., et al.: "c-myc is a downstream target of Smad pathway"J. Biol. Chem.. 277・1. 854-861 (2002)

2001 年度実績報告書

宮園浩平東京大学, 大学院・医学系研究科, 教授 (90209908)