発達期小脳における選択的シナプス強化・除去に関与する新たな遺伝子と機能分子の探索

2001 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 12308041
• 研究機関: 金沢大学
• 研究代表者: 狩野 方伸 金沢大学, 医学系研究科, 教授 (40185963)
• 研究分担者: 井ノ口 馨 (株)三菱化学, 生命科学研究所・プロジェクト研究センター, 主任研究員プロジェクトリーダー ; 田端 俊英 金沢大学, 医学系研究科, 助手 (80303270) ; 橋本 浩一 金沢大学, 医学系研究科, 助手 (00303272)
• キーワード: 生後発達 / 小脳 / プルキンエ細胞 / 登上線維 / 多重支配 / シナプス除去 / 神経活動 / critical period

研究概要

生後発達における活動依存的な神経回路網形成の分子機構を明らかにする目的で、小脳プルキンエ細胞のシナプス除去をモデルとして研究を行なった。小脳プルキンエ細胞は、成熟動物では1本の登上線維によって支配されるが、発達初期には3〜5本の登上線維の多重支配を受けている。発達につれて過剰な登上線維が除去され、生後約20日までに成熟型の1対1の結合が完成する。我々のこれまでの研究から、小脳登上線維シナプスの発達過程において、生後15日から18日が神経活動に依存するcritical periodであり、この過程に代謝型グルタミン酸受容体1型からγ型プロテインキナーゼC(PKCγ)に至るシグナル伝達系が関与することが明らかにされた。すなわち、登上線維シナプスの形成・除去に関与する遺伝子はcritical periodにプルキンエ細胞でPKCγ依存的に発現が調節されていることが強く示唆された。平成12年度の研究において、マウス小脳プルキンエ細胞のみから調製したRNAを用いてcritical periodの前後で発現が制御される遺伝子およびPKCγの制御下にある遺伝子をdifferential display法で探索した結果、23の候補遺伝子を同定した。本年度は、これら23の候補遺伝子をさらに4つに絞り込んだ。その中には、チューブリンの重合、脱重合を制御するスタスミンなど既知の遺伝子と、未同定の遺伝子が含まれていることが明らかになった。さらにこれらの候補遺伝子の機能的意義を解明するため、遺伝子改変マウスの作成に着手した。

研究成果

• [文献書誌] Ohno-Shosaku, T: "Endogenous cannabinoids mediate retrograde signals from depolarized postsynaptic neurons to presynaptic terminals"Neuron. 29. 729-738 (2001)
• [文献書誌] McGee, A.W.: "PSD-93 knock-out mice reveal that neuronal MAGUKs are not required for development or function of parallel fiber synapses in cerebellum"J. Neurosci.. 21. 3085-3091 (2001)
• [文献書誌] Miyata. M: "Deficient long-term synaptic depression in the rostral cerebellum correlated with impaired motor learning in phospolipase C β4 mutant mice"Eur. J. Neurosci.. 13. 1945-1954 (2001)
• [文献書誌] Maejima, T.: "Presynaptic inhibition caused by retrograde signal from metabotropic glutamate to cannabinoid receptors"Neuron. 31. 463-475 (2001)
• [文献書誌] Hashimoto, K.: "Roles of GluRδ2 and mGluR1 in climbing fiber synapse elimination during postnatal cerebellar development"J. Neurosci.. 21. 9701-9712 (2001)
• [文献書誌] 橋本浩一: "小脳シナプス可塑性の分子機構"神経研究の進歩. 45. 249-260 (2001)
• [文献書誌] Maejima, T.: "Endogenous cannabinoid as a retrograde messenger from depolarized postsynaptic neurons to presynaptic terminals"Neurosci. Res.. 40. 205-210 (2001)
• [文献書誌] Hashimoto, K.: "Roles of phospholipase C β4 in synapse elimination and plasticity indeveloping andf mature cerebellum"Mol. Neurobiol.. 23. 69-82 (2001)
• [文献書誌] 橋本浩一: "小脳プルキンエ細胞におけるシナプス可塑性とカルシウム"Clinical Calcium. 11. 1432-1439 (2001)
• [文献書誌] 橋本浩一: "発達脳におけるシナプス除去のメカニズム"医学のあゆみ. 199. 531-534 (2001)