2001 年度実績報告書

マンノース結合型イネレクチンといもち病菌のConA結合型糖鎖との相互作用

研究課題

研究課題/領域番号	12460021
研究機関	東京農工大学
研究代表者	寺岡徹東京農工大学, 農学部, 教授 (60163903)
研究分担者	千葉一裕東京農工大学, 農学部, 助教授 (20227325)
キーワード	イネ / レクチン / 形質転換 / Con A 結合型糖鎖 / 病害抵抗性 / いもち病 / 病原性因子
研究概要	本年度実施計画の下記の3項目について以下の成果が得られている。 (1)MRL遺伝子の構造解析と未同定イソ体遺伝子の探索 MRL4.85遺伝子の構造解析から、本遺伝子はalternative splicingにより、flame shiftを起こさず、8残基欠失した分子量の小さな翻訳産物をストレス時には生成すること、転写制御領域は類似のsalT遺伝子とは異なり、一部が大きく欠失して異なるABA反応配列を持つこと、本遺伝子を含めてイソレクチン遺伝子と想定される遺伝子配列がイネ第1染色体上にあり、MRL4.85遺伝子の上流約130kbに存在することがイネゲノムBACライブラリーの解析およびイネゲノム研究結果から示唆された。 (2)MRL4.85遺伝子発現制御組換え体イネの創成 CaMV35Sプロモーターを高発現化させたpC1304Eの下流に、GFP/GUSのレポーター遺伝子およびMRL4.85遺伝子を正逆両方向に組み込んだbinary vectorを構築した。そのベクター系を用いて、MRL4.85遺伝子の発現増幅型および発現抑制型形質転換体イネを創成中で、形質転換体イネカルスレベルでの選抜検定を終え、MRL遺伝子の発現量を検定している。それらが成苗になった時点で、いもち病金接種ならびに本菌のConA結合型糖タンパク質との相互作用を検証する。 (3)いもち病菌が分泌するConA結合型糖タンパク質糖鎖の構造解析いもち病菌胞子発芽液からConA affinityクロマト,HPLC等で、目的とする主要糖タンパク質(約28K)の精製手法を確立した。その修飾糖鎖はN一グルコシドではなく、O-グルコシド結合と推定され、末端糖を標識後、ペプチド鎖をアルカリ分解し、NMRならびにTOF-MS等の機器分析により構造解析を行っている。また、N-末端アミノ酸配列、およびプロテーアーゼ消化後の内部アミノ酸部分配列の解析から、多くのアミノ酸残基が糖鎖修飾を受けている可能性が示唆された。

研究成果
(5件)

すべてその他

すべて文献書誌 (5件)

[文献書誌] KAMAKURA T., et al.: "A Novel Gene CBP1, Encoding a Putative Extracellular Chitin Binding Protein, May Play an Important Role in the Hydrophobic Surface Sensing of Magnaporthe grises During Appressorium Differentiation"Molecular Plant-Microbe Interactions. 15(in press). (2002)
[文献書誌] Chiba K., et al.: "Electrocatalytic Intermolecular Olefin Cross-Coupling by Anodically Induced Formal [2+2] Cycloaddition between Enol Ethers and Alkenes"J. Am. Chem. Soc.. 123. 11314-11315 (2001)
[文献書誌] Reddy, S.H.K., Chiba K., et al.: "Anodic oxidations of electron-rich olefins: radical cation based approaches to the synthesis of bridged bicyclic ring skeletons"Tetrahedron. 57(24). 5183-5197 (2001)
[文献書誌] Kitano Y., Chiba K., Tada M.: "Highly Efficient Conversion of Alcohols to Isocyanides"Synthesis. 3. 437-443 (2001)
[文献書誌] Chiba K., et al.: "Benzylic Intermolecular Carbon-Carbon Bond Formation by Selective Anodic Oxidation of Dithioacetals"Org. Lett.. 3(8). 1245-1248 (2001)

2001 年度 実績報告書

マンノース結合型イネレクチンといもち病菌のConA結合型糖鎖との相互作用

研究代表者

寺岡 徹 東京農工大学, 農学部, 教授 (60163903)

研究成果

[文献書誌] KAMAKURA T., et al.: "A Novel Gene CBP1, Encoding a Putative Extracellular Chitin Binding Protein, May Play an Important Role in the Hydrophobic Surface Sensing of Magnaporthe grises During Appressorium Differentiation"Molecular Plant-Microbe Interactions. 15(in press). (2002)

[文献書誌] Chiba K., et al.: "Electrocatalytic Intermolecular Olefin Cross-Coupling by Anodically Induced Formal [2+2] Cycloaddition between Enol Ethers and Alkenes"J. Am. Chem. Soc.. 123. 11314-11315 (2001)

[文献書誌] Reddy, S.H.K., Chiba K., et al.: "Anodic oxidations of electron-rich olefins: radical cation based approaches to the synthesis of bridged bicyclic ring skeletons"Tetrahedron. 57(24). 5183-5197 (2001)

[文献書誌] Kitano Y., Chiba K., Tada M.: "Highly Efficient Conversion of Alcohols to Isocyanides"Synthesis. 3. 437-443 (2001)

[文献書誌] Chiba K., et al.: "Benzylic Intermolecular Carbon-Carbon Bond Formation by Selective Anodic Oxidation of Dithioacetals"Org. Lett.. 3(8). 1245-1248 (2001)

2001 年度実績報告書

寺岡徹東京農工大学, 農学部, 教授 (60163903)