| 研究課題/領域番号 |
12460022
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| 研究機関 | 名古屋大学 |
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研究代表者 |
川北 一人 名古屋大学, 大学院・生命農学研究科, 助教授 (90186065)
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| 研究分担者 |
吉岡 博文 名古屋大学, 大学院・生命農学研究科, 助手 (30240245)
道家 紀志 名古屋大学, 大学院・生命農学研究科, 教授 (80023472)
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| キーワード | 感染防御応答 / 抵抗性 / タバコ / ジャガイモ / エリシター / Differential hybridization / Subtraction / ジャガイモ疫病菌 |
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| 研究概要 |
植物の抵抗反応誘導機構についての新たな知見を得るため、タバコあるいはジャガイモ植物とジャガイモ疫病菌菌体壁成分エリシター(HWC)の系を用い、防御応答時に特異的に発現誘導される遺伝子のスクリーニングを行った。まず、先に確立したタバコ植物の系を用いて、抵抗反応誘導時に特異的に発現する遺伝子の単離をDifferential hybridization法により試みた。水あるいはHWCの処理後6、12時間のタバコ葉全RNAからプローブcDNAを作製し、HWC処理12時間後のタバコ葉から作製したcDNAライブラリーの各コロニーから調製したプラスミドDNAとハイブリダイズした。200cDNAクローンのうち、HWC処理タバコ葉のcDNAプローブと特異的にハイブリダイズした6クローンを得た。EIG-B39とEIG-D14はSAR8.2、EIG-G7はグリシンリッチタンパク質、EIG-I30はエクステンシン、EIG-I24はアシルトランスフェラーゼ、EIG-J7は未知タンパク質であった。ノーザン解析により、いずれも非病原菌であるダイズ斑点細菌病菌接種葉やサリチル酸処理葉において発現が認められた。
次に、HWC未処理および処理後3、6時間のジャガイモ塊茎より全RNAを抽出し、Subtraction法を用いたクローニングを行った。120クローンのうち63クローンが既知遺伝子と相同性を示し、感染特異的(PR)タンパク質、グルタチオン-S-トランスフェラーゼ、ペルオキシダーゼ、カタラーゼ、アミノシクロプロパンカルボン酸オキシダーゼの各遺伝子や傷処理誘導性遺伝子が含まれていた。HWCやアラキドン酸処理に応答したこれら遺伝子の発現の増加がノーザン解析により認められた。疫病菌接種時の応答性を調べたところ、親和性菌と非親和性菌の接種により異なる発現パターンを示す遺伝子が4種存在した。
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