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2003 年度 研究成果報告書概要

イネ根圏窒素固定菌の窒素固定能と生態学的生存力の改良強化の研究

研究課題

研究課題/領域番号 12460048
研究種目

基盤研究(B)

配分区分補助金
応募区分一般
研究分野 応用微生物学・応用生物化学
研究機関明治大学

研究代表者

魚住 武司  明治大学, 農学部, 教授 (40011978)

研究期間 (年度) 2000 – 2003
キーワード窒素固定菌 / Paenibacillus / Pantoea / Klebsiella / イネ / ススキ / イネ科 / 抗菌性
研究概要

イネの根圏において空中窒素(N_2)を強力に固定しかつ生態学的に強い生存力を有する菌株を獲得することを目的として、イネ科植物の根圏から新たな窒素固定菌のスクリーニングをおこなった。イネとススキをふくむ多数の植物根および付着土壌から、無窒素培地に生育し、窒素固定酵素の活性としてアセチレン還元能を示す菌株を探索した結果、グラム陰性通性嫌気性の桿菌4株と、グラム陰性胞子形成運動性通性嫌気性の桿菌2株を取得した。API20システムによる同定の結果、前者のうち3株は既知の窒素固定菌Klebsiella pneumoniaeと一致し、残り1株(E1030株)はPanatoea sp.に属すると判定された。E1030株は強い窒素固定能をしめし、かつ広スペクトルの抗菌性物質の生産性を示したので、目的の菌株の候補となったが、菌株の保存中に抗菌性が失われた。後者の2株は、API20とAPI50による生理学的テストと16SrDNAの配列決定の結果、Paenibacillus sp.に属することが判明し、16SrDNA配列の相同性が既知菌株にたいして97%あるいは96%であったので新種と判断し、それぞれPaenibacillus fujiensis sp.nov.Br1、Paenibacillus abekawaensis sp.nov.MG1と命名してDDBJデータバンクに登録し、Br1株のAccession No.AB092351,Taxonomy ID:208550と、MG1株のAccession No.AB119649,Taxonomy ID:244733を得た。
P.fujiensis Br1株の窒素固定能(アセチレン還元活性)は、既知のKlebsiella、Azospirillum、Herbaspirillumに属する諸菌株に比べて7〜15倍の強さを示した。無窒素培地に無菌的に栽培したイネにこれらの窒素固定菌を接種し、草丈と乾燥重量にあたえる効果を調べた結果、Br1株は、t検定において最高クラスに属し、草丈においては、既知の標準株Klebsiella pneumoniae M5a1とAzospirillum lipoferum COC8よりも優れ、乾燥重量においてはM5a1と同等であり、COC8よりも優れていた。このように、従来の既知菌株よりも優れた窒素固定菌株を取得することができた。

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公開日: 2006-07-11  

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