局所生体防御ホルモンシステムの解明

2002 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 12460129
• 研究機関: 北海道大学
• 研究代表者: 昆 泰寛 北海道大学, 大学院・獣医学研究科, 助教授 (10178402)
• 研究分担者: 岩永 敏彦 北海道大学, 大学院・獣医学研究科, 教授 (10160128) ; 稲波 修 北海道大学, 大学院・獣医学研究科, 助教授 (10193559) ; 遠藤 大二 酪農学園大学, 獣医学部, 助教授 (40168828)
• キーワード: 血管平滑筋 / 腎臓 / 精巣 / トランスジェニックマウス / iNOS / ホルモン / 免疫組織化学 / アポトーシス

研究概要

レニン-アンギオテンシン系(RAS)は血圧調節と水・電解質代謝の調節に働く。RASのトリガー的酵素であるレニンは主に腎臓から分泌されるが、他組織にも存在し、従来考えられなかった調節系の存在が報告されている。本研究の目的は、局所免疫機構に関与するホルモンシステムを特にRASを中心に解明することにある。一昨年度は、レニンノックアウトマウスの作製とその形態学的観察を中心に行った。すなわち、ホモ個体の腎臓は種々の程度に水腎症の形態を呈し、腎臓内血管は内皮細胞の肥厚と、平滑筋細胞の増殖を特徴としていた。昨年度は、このレニンノックアウトマウス腎臓を用い血管に分布する神経をPGP9.5による免疫染色を行い可視化した。その結果、多数の神経終末が糸球体近傍に多数みとめられ、血圧調節に不可欠な存在であるRASが十分に機能しないために惹起された代償性変化と考えられた。
今年度は、精巣における局所免疫防御に関連する因子としての一酸化窒素(NO)に着目し、その合成酵素であるiNOSの発現を免疫組織化学的ならびに分子生物学的に観察した。その結果、iN0Sは精細管セルトリ細胞の基底膜側に出現し、精細管ステージによって異なる発現態度を示すことが明らかとなった。iNOSの発現はステージI-VIIIにおいて顕著であったことから、iNOSは微小精巣環境とくに精巣-血液関門を構成する一因子としての役割を果たすものと考えられた。また、精巣において減数分裂中期特異的アポトーシスを示すマウスを解析し、その原因遺伝子としてExonuclease 1の存在を明らかにした。さらに、卵管局所から分泌されるOviduct glycoprotein (OGP)の機能を解析するため、そのプロモーターをSVTに連結することでトランスジェニックマウスを作製し、局所発現と腫瘍化について甲状腺ホルモンの関連する結果を得た。

研究成果

• [文献書誌] Miyoshi, I.: "Targeting oncogenesis by introduction of a 5.2-Kbp segment of the 5' regulatory region of the human thyrotropin β-subunit gene"Endocrine Research. 27・4. 387-398 (2001)
• [文献書誌] Miyoshi, I.: "Mouse transgenic for murine oviduct-specific glycoprotein promoter-driven Simian Virus 40 large-T antigen : Tumor formation and its hormonal regulation"Molecular Reproduction and Development. 63. 168-176 (2002)
• [文献書誌] Okui, T.: "Deficiency in nuclear accumulation of G22p1 and Xrcc5 proteins in hyper-radiosensitive Long-Evans Cinnamon (LEC) rat cells after X irradiation"Radiation Research. 157. 553-561 (2002)
• [文献書誌] Kitamura, G.: "Inhibitory effects of opioids on voltage -dependent Ca2+ channels and catecholamine secretion iii cultured porcine adrenal chromaffin cells"Brain Research. 924・1-2. 11-22 (2002)
• [文献書誌] Kon, Y.: "Expression and distribution of inducible nitric oxide synthase in mouse testis"Japanese Journal of Veterinary Research. 50・2-3. 115-123 (2002)
• [文献書誌] Namiki, Y.: "Genetic mutation associated with meiotic metaphase-specific apoptosis in MRL/MpJ mice"Molecular Reproduction and Development. 64. 179-188 (2003)