| 研究課題/領域番号 |
12460133
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| 研究機関 | 東京大学 |
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研究代表者 |
大塚 治城 東京大学, 大学院・農学生命科学研究科, 教授 (80261957)
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| 研究分担者 |
松本 安喜 東京大学, 大学院・農学生命科学研究科, 助教授 (90251420)
松本 芳嗣 東京大学, 大学院・農学生命科学研究科, 助教授 (00173922)
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| キーワード | BHV-1 / PRV / gB / gC / HmLu-1 / IE gene / green fluorescent protein / A31細胞 |
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| 研究概要 |
我々は先にウシヘルペスウイルス1型(BHV-1)のゲノムにブタのオーエスキー病ウイルス(PRV)のgB及びgC遺伝子を組み込んだ組み換えウイルスBHV-1/TF7-6株を作出し、BHV-1にとってsemipermissiveであるハムスター細胞HmLu-1に対する吸着侵入能が著しく増加していること、さらに侵入ウイルスの核への移行、ウイルスゲノムの複製、成熟ウイルスの生成も増加していることを認めた。平成12年度の研究においてPRVの前初期遺伝子(IE gene)プロモータの下流にgreen fluorescent protein(GFP)遺伝子を配置したユニットを作成し、BHV-1/TF7-6およびその親ウイルスであるBHV-1dltk株のgG遺伝子部位に組み込んだ2つの組み換え体、BHV-1/TF7-6/GFPおよびBHV-1dltk/GFPを作出した。これの組み換えBHV-1をnon-permissiveであるマウスBalb3T3-A31細胞(A31)に感染させGFPの発する蛍光を追跡した結果以下の事が明らかになった。1)BHV-1/TF7-6/GFPを感染させたA31においては比較的多くの細胞核中にGFP由来の蛍光が見られたが、BHV-1dltk/GFP感染細胞においては殆ど蛍光は見られなかった。2)ヘルペスウイルスDNA複製阻害剤であるPAAを培地に加えても2)の結果は変わらない。3)BHV-1のIE遺伝子は発現しておらず、ウイルスDNAの複製は起こっていない。4)PRVのIEプロモータとBHV-1のIEプロモータをトランスフェクション法にてA31細胞において比較した結果、前者は強い活性を示すが、後者は非常に弱い活性しか示さなかった。
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