食細胞内での細菌の生き残り戦略:ロドコッカス・エクイ病原性プラスミドの機構解析

2001 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 12460140
• 研究機関: 北里大学
• 研究代表者: 高井 伸二 北里大学, 獣医畜産学部, 助教授 (80137900)
• 研究分担者: 斑目 広郎 麻布大学, 獣医学部, 助教授 (20173768) ; 関崎 勉 動物衛生研究所, 病原機能研究室, 室長 ; 角田 勤 北里大学, 獣医畜産学部, 助手 (80317057)
• キーワード: ロドコッカス・エクイ / 病原性プラミスド / 塩基配列 / 病原性 / マクロファージ / 細胞内寄生菌 / 馬 / 毒力

研究概要

本研究の目的は病原性プラスミド上に存在する遺伝子の機能解析を行い、病原性プラスミドが生み出す食菌抵抗性・殺菌回避メカニズムを分子遺伝学的に明らかにしようとするものである。平成13年度には、中等度毒力株の病原性プラスミドの全塩基配列を決定した。中等毒力株は豚の下顎リンパ節及びAIDS患者から分離され、Vap Aと相同性の高いVap Bがその病原性プラスミド上にコードされているが、マウスに対する50%致死量は約10倍低い。両株の病原性プラスミドの構造が遺伝子レベルで明らかになれば、それらの相違点が毒力の差を反映していることが予想される。ショットガンクローニング法を用いたAIDS患者由来中等度毒力株の79kb病原性プラスミド(pREA3)の全塩基配列を決定した。pREA3は79,288bpで、71個のOREの存在が推定され、原核生物の既知の蛋白質に相同性が高い17個のOREがあった。強毒株の病原性プラスミドと同様にtransposon resolvaseとDNA invertaseに挟まれたpathogenicity islandが存在した。pathogenicity island以外の領域は高い相同性を示し、全体では強毒株に存在するORFの約80%(52/64ORF)が保存されていた。pathogenicity island領域にはVap Bとそれに高い相同性を示すORFがその上流に5つ認められた(VapI〜L)。pathogenicity is land以外の領域が両者で良く保存されていることから、強毒株と中等度毒力株の違いはVap familyの構成の相違による可能性が示唆された。

研究成果

• [文献書誌] Morton, AC et al.: "Epidemiology Of Rhodococcus equi Strains On Thoroughbred Horse Farms"Appl Environ Microbiol. 67. 2167-2175 (2001)
• [文献書誌] Takai, S., et al.: "Prevalence of virulent Rhodococcus equi in soil from 5 R. equi-endemic horsebreeding farms and restriction fragment length polymorphisms of virulence plasmids in isolates from soil and infected foals in Texas"J. Vet. Diag. Invest.. 13. 489-494 (2001)
• [文献書誌] Takai, S., et al.: "Rhodococcus equi pneumonia in a crossbred foal in Kumamoto: clinical isolates contained new virulence plasmids,90-kb type DI and type IV"Vet. Microbiol.. 82. 373-381 (2001)
• [文献書誌] Horowitz, ML et al.: "Application of Sartweii S Model (Logarithlmic-normal Distribution of Incubation period) to age at onset andage at death of foals with Rhodococcus eaui pneumonia as evidence of perinatal infection"J. Vet. Intern. Med.. 15. 171-175 (2001)
• [文献書誌] Flynn, O. et al.: "Virulence-associated protein characterisation of Rhodococcus equi isolated from bovine lymph nodes"Vet. Microbiol.. 78. 221-228 (2001)
• [文献書誌] Takai, S. et al.: "Prevalence of virulent Rhodococcus equi in isolates from soil collected from 2 horse farms in South Africa and restricition fragment length polymorphisms of virulence plasmids in the isolates from infected foals, dog and monkey"Onderstepoort J. Vet. Res. 68. 105-110 (2001)