網膜中心動脈の血栓性閉塞・溶解による新たな虚血再潅流モデルと薬理的神経細胞死制御

2001 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 12470015
• 研究機関: 岐阜大学
• 研究代表者: 植松 俊彦 岐阜大学, 医学部, 教授 (50151832)
• 研究分担者: 松野 浩之 岐阜大学, 医学部, 助手 (40273148) ; 丹羽 雅之 岐阜大学, 医学部, 助教授 (40156146) ; 小澤 修 岐阜大学, 医学部, 助教授 (90225417)
• キーワード: 網膜 / 神経細胞死 / 線溶系

研究概要

1.薬物投与による網膜神経細胞死モデルの確立:
神経細胞死にはグルタミン酸受容体が関与すると考えられている。グルタミン酸受容体の種々アゴニスト=薬物投与後に経時的に屠殺しTUNEL法にてアポトーシス細胞を染色して、網膜神経細胞のグルタミン酸受容体刺激を介するアポトーシス感受性のトポグラフィーを観察し、網膜細胞死に対して至適な条件を決定した。
2.網膜神経障害に対する低体温の影響
グルタミン酸受容体アゴニスト刺激ならびに虚血再潅流に伴う網膜神経細胞障害に対する低体温の影響を検討したところ、体温の降下度に平行した神経障害軽減作用が観察された。
3.線溶系因子の虚血性臓器障害への関与の解明:
線溶系因子のノックアウトマウスを使用して、薬物投与による網膜神経細胞障害に及ぼす各線溶因子の関与につき検討したところ、虚血-再潅流にともなう神経細胞死ではWildマウスと差がなかったが、NMDA刺激に伴う神経細胞死は有意に軽減された。
以上の研究により、視力障害を引き起こす網膜視神経細胞の死特にアポトーシスの生成の時間経過を実験動物ごとに明らかにすることができた。また、低体温によって非特異的に網膜神経細胞死を抑制することが可能なことが明らかとなり、また、興奮性アミノ酸による視神経細胞死にt-PAというプロテアーゼが関与していることが明らかとなった。これ以外にも多くの生理活性物質が視神経細胞死に関与し、その関与の度合いも時間経過とともに変化していると考えられ、さらに研究を継続することによって、視力障害に直接結びつく視神経細胞死の予防・治療のための薬理学的・体系的ストラテジーを確立する上で重要な貢献をなすことができると考えている。

研究成果

• [文献書誌] Hiroyuki Matsuno: "Plasmin generation plays different roles in the formation and removal of arterial and venous thrombus in mice"Thromb Haemost. 87. 98-104 (2002)
• [文献書誌] Osamu Kozawa: "Divergent regulation by p44/p42 MAP kinase and p38 MAP kinase of bone morphogenetic protein-4-stimulated osteocalcin……"J Cell Biochem. 84. 583-589 (2002)
• [文献書誌] Masayuki Niwa: "Differential uptake of grepafloxacin by human circulating blood neutrophils and those exudated into tissues"Eur J Pharmacol. 428. 121-126 (2001)
• [文献書誌] Koichi Hotta: "The loss of susceptibility to apoptosis in exudated tissue neutrophils is associated with their nuclear factor-kappaB activation"Eur J Pharmacol. 433. 17-27 (2001)
• [文献書誌] Osamu Kozawa: "AlphaB-crystallin, a low-molecular-weight heat shock protein, acts as a regulator of platelet function"Cell Stress Chaperones. 6. 21-28 (2001)
• [文献書誌] Masayuki Niwa: "Caspase activation as an apoptotic evidence in the gerbil hippocampal CA1 pyramidal cells following transient……"Neurosci Lett. 300. 103-106 (2001)