抗体産生不全症の発症機構とその責任遺伝子の解析

2000 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 12470037
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 塚田 聡 大阪大学, 医学系研究科, 助手 (60273637)
• 研究分担者: 橋本 章司 大阪大学, 医学部・附属病院, 医員
• キーワード: 抗体産生不全症 / 無ガンマグロブリン血症 / Btk / BLNK / ホスホリパーゼC / Syk

研究概要

無ガンマグロブリシ血症の責任分子Btkの活性化機構、BtkによるB細胞内のカルシウムシグナルのスイッチオンの機構の解析を行なった。すなわち、我々はB細胞内でのSyk依存的なBtkの活性化がB細胞特異的アダプター分子BLNKを介していることを明らかにした。SykはBLNKをチロシンリン酸化するがそのリン酸化BLNKにBtkが会合し、SykはBLNK上でBtkの活性化に重要な551番のチロシン残基をリン酸化し、それによってBtkが活性化されることを明らかにした。また、Btkの主要な下流経路はホスホリパーゼ(PLC)γ2を活性化させ、カルシウムの動員をおこすことであるが、BtkによるPLCγ2の活性化機構を明らかにした。BLNK上でBtk、SykはPLCγ2と会合し、両キナーゼによってPLCγ2は活性化されるが、Btkによって実際にリン酸化されるPLCγ2のチロシン残基を決定し、それらの残基がB細胞レセプターの刺激後に実際にB細胞内でチロシンリン酸化されることを示した。さらにこれらの残基のリン酸化がPLCγ2の活性化に必須であることを明らかにした。一方、実際のXLA患者検体の解析によって、Btkの欠損によって生じるB細胞の分化停止点がプレB細胞レセプターを高発現している初期プレB細胞の段階であることを見い出した。このことはBtkがプレB細胞レセプターのシグナル伝達に関与していることを強く示唆していた。また本邦の100名以上の低ガンマグロブリン血症例のBtkの蛋白質および遺伝子レベルの解析を行ない、その90%以上にBtkの異常が存在することを明らかにした。

研究成果

• [文献書誌] Kurosaki,T.and Tsukada,S.: "BLNK : Connecting Syk and Btk to calcium signals."Immunity.. 12. 1-5 (2000)
• [文献書誌] Tsukada,S.and Kurosaki,T.: "Central linker protein and cytoplasmic tyrosine kinases in B cell activation."Modem Asp.Immunobiol.. 1. 75-77 (2000)
• [文献書誌] Kanegane,H.,Tsukada,S.: "Detection of Mutations in Bruton's tyrosine kinase in hypogammaglobulinemlc individuals registered as common variable immunodeficiency in the Japan immunodeficiency registry."Clin.Exp.Immunol.. 120. 512-517 (2000)
• [文献書誌] Nomura,K.,Kanegane,H.,Tsukada,S.: "The genetic defect in human X-linked agammaglobulinemia impedes a maturational evolution of pro-B cells into later stage of pre-B cells in B cell differentiation pathway."Blood.. 96. 610-617 (2000)
• [文献書誌] Baba,Y.,Hashimoto,S.Tsukada,S.: "BLNK mediates Syk-dependent Btk activation."Proc.Natl.Acad.Sci.USA.. (in press). (2001)
• [文献書誌] Tsukada,S.,Baba,Y.,and Watanabe,D.: "Btk and BLNK in B cell development."Adv.Immunol.. (in press). (2001)