2001 年度実績報告書

膜脂質シグナリングによるアポトーシス誘導・制御機構の解明

研究課題

研究課題/領域番号	12470042
研究機関	(財)応用生化学研究所
研究代表者	野澤義則 (財)応用生化学研究所, 部長 (10021362)
研究分担者	坂野喜子岐阜大学, 医学部, 助教授 (50116852) 田中雅嗣 (財)応用生化学研究所, 部長 (60155166) 赤尾幸博 (財)応用生化学研究所, 部長 (00222505)
キーワード	アポトーシス / スフィンゴミエリン / セラミド / ホスホリパーゼD / PI3キナーゼ / Akt
研究概要	アポトーシスの誘導と抑制の両者の調節機構を明らかにすることを目的として、コリン含有リン脂質代謝系のクロストークを含んだ膜脂質シグナリングネットワークの総括的な検索を行なった。スフィンゴミエリナーゼによるスフィンゴミエリンの分解により生ずるセラミドはアポトーシス誘導因子として知られており、前立線癌LNCaP細胞を抗ガン剤カンプトテシンで処理するとアポトーシスが誘導され顕著なセラミドの増加が認められた。このセラミドの増加は合成阻害剤fumonisinB1(FB1)により阻害されるため合成により産生されると考えられる。しかし、アポトーシス誘導はFB1処理により抑制されないことから、セラミド産生はアポトーシス誘導とは関連しないことが示唆された。一方、スフィンゴシンのスフィンゴシンキナーゼにより生ずるスフィンゴシン1-リン酸(S1P)は、アポトーシスの抑制に関与することが知られており、S1P受容体ED(G3過剰発現CHO細胞を用いてS1P刺激による生存シグナルの活性化を検討した。S1P刺激によるPLD活性化,PI3キナーゼ・Aktの活性化を検討した。S1P刺激によりPI3キナーゼ、Aktが活性化されるが、1-ブタノールにより阻害され、2-ブタノールでは影響されず、また、wild PLD1やcatalytically negative PLD1の過剰発現により、S1P刺激によるAktの活性化は、前者で促進され、後者で抑制された。さらに、Streptomyces cromofuscus PLD処理によりPI3キナーゼAktの活性化が引き起こされた。これらの結果から、PLDは生存シグナルとして知られているPI3キナーゼ・Aktの活性化を介してアポトーシス防御に関与することが推測された。

研究成果
(7件)

すべてその他

すべて文献書誌 (7件)

[文献書誌] Banno, Y.et al.: "Involvement of PLD in S-1-P-induced activation of phosphatidylinositol 3-kinase and Akt in Chinese hamster ovary cells overexpressing EDG3"J.Biol.Chem.. 276. 35622-35628 (2001)
[文献書誌] Banno, Y.et al.: "Involvement of ERK and p38 MAP kinase in oxidative stress-induced-phospholipase D activation in PC12 cells"NeuroReport. 12. 2271-2275 (2001)
[文献書誌] Sawada, M.et al.: "p53 regulates ceramide formation by neutral sphingomyelinase through reactive oxygen species in human glioma cells"Oncogene. 20. 1368-1378 (2001)
[文献書誌] Osawa, Y.et al.: "TNF-α induced sphingosine 1-phosphate inhibits apoptosis through a phosphatidylinositol 3-kinase/Akt pathway in human hepatocytes"J.lmmunol.. 167. 173-180 (2001)
[文献書誌] Murate, T.et al.: "Cell type-specific localization of sphingosine kinase 1a in human tissues"J.Histochem.Cytochem.. 49. 845-855 (2001)
[文献書誌] Osawa, Y. et al.: "Sphingosine kinase regulates hepatoma cell differentiation : roles of hepatocyte nuclear factor and retinoid receptor"Biochem.Biophys.Res.Commun.. 286. 673-677 (2001)
[文献書誌] 野澤義則: "Navigator, Vascular Biology ナビゲーター"メディカルレビュー社(丸山征郎, 安藤譲二, 佐藤靖史編). 2 (2001)

2001 年度 実績報告書

膜脂質シグナリングによるアポトーシス誘導・制御機構の解明

研究代表者

野澤 義則 (財)応用生化学研究所, 部長 (10021362)

研究成果

[文献書誌] Banno, Y.et al.: "Involvement of PLD in S-1-P-induced activation of phosphatidylinositol 3-kinase and Akt in Chinese hamster ovary cells overexpressing EDG3"J.Biol.Chem.. 276. 35622-35628 (2001)

[文献書誌] Banno, Y.et al.: "Involvement of ERK and p38 MAP kinase in oxidative stress-induced-phospholipase D activation in PC12 cells"NeuroReport. 12. 2271-2275 (2001)

[文献書誌] Sawada, M.et al.: "p53 regulates ceramide formation by neutral sphingomyelinase through reactive oxygen species in human glioma cells"Oncogene. 20. 1368-1378 (2001)

[文献書誌] Osawa, Y.et al.: "TNF-α induced sphingosine 1-phosphate inhibits apoptosis through a phosphatidylinositol 3-kinase/Akt pathway in human hepatocytes"J.lmmunol.. 167. 173-180 (2001)

[文献書誌] Murate, T.et al.: "Cell type-specific localization of sphingosine kinase 1a in human tissues"J.Histochem.Cytochem.. 49. 845-855 (2001)

[文献書誌] Osawa, Y. et al.: "Sphingosine kinase regulates hepatoma cell differentiation : roles of hepatocyte nuclear factor and retinoid receptor"Biochem.Biophys.Res.Commun.. 286. 673-677 (2001)

[文献書誌] 野澤義則: "Navigator, Vascular Biology ナビゲーター"メディカルレビュー社(丸山征郎, 安藤譲二, 佐藤靖史編). 2 (2001)

2001 年度実績報告書

野澤義則 (財)応用生化学研究所, 部長 (10021362)