コンディショナルジーンターゲティング法による生体内糖脂質の機能解析

2001 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 12470055
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 竹田 潤二 大阪大学, 先端科学技術共同研究センター, 教授 (50163407)
• 研究分担者: 近藤 玄 大阪大学, 医学系研究科, 助教授 (40243258)
• キーワード: LCB2遺伝 / Cre / loxP / Tリンパ球 / コンディショナルジーンターゲティング / スフィンゴ脂質 / キメラマウス / トランスジェニックマウス

研究概要

1.表皮特異的スフィンゴ脂質欠損マウス作製
表皮は他の臓器と異なり、セラミドを中心としたスフィンゴ脂質に富んでいる。そのスフィンゴ脂質は、表皮バリヤーとして重要であることが示唆されているが、直接的な証拠は存在しない。そこで、スフィンゴ脂質生合成の最初のステップであるserineとpalmitoilCoAの縮合反応を触媒するSerine-palmitoil transferaseをコードとする遺伝子LCB2のエクソンにloxP配列が挿入されたマウスを作製した。そのマウスは離乳時に死亡する。さらに電顕で顆粒層でみられるlamellar granuleの中の層構造が完壁に消失していることが判明した。
2.スフィンゴ脂質欠損Tリンパ球を解析するためLCBfloxマウスとLck-Creマウスの交配
Tリンパ球特異的にLCB2遺伝子を破壊し、スフィンゴ脂質が欠損したTリンパ球を有するマウスを交配により樹立した。胸腺を解析するとCD4^+、CD8^+シングルポジティブ細胞が極端に減少していたので、スフインゴ脂質がポジテイブセレクションに重要な役割があることが判明した。

研究成果

• [文献書誌] Nishimura, J. et al.: "Efficient retrovirus-mediated PIG-A gene transfer and stable restoration of GPI-anchored protein expression in cells with the PNH phenotype"Blood. 97. 3004-3010 (2001)
• [文献書誌] Kawane, K. et al.: "Requirement of DNase II for definitive erythropoiesis in the mouse fetal liver"Science. 292. 1546-1549 (2001)
• [文献書誌] Horie, K. et al.: "Efficient chromosomal transposition of a Tcl/mariner-like transposon Sleeping Beauty in mice"Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 98. 9191-9196 (2001)
• [文献書誌] Sano, S. et al.: "Stat3 in thymic epithelial cells is essential for postnatal maintainance of thymic architecture and thymocyte survival"Immunity. 15. 261-273 (2001)