SLE患者自己抗体産生B細胞でのRAG発現不全の解析とその治療応用

2001 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 12470116
• 研究機関: 聖マリアンナ医科大学
• 研究代表者: 鈴木 登 聖マリアンナ医科大学, 医学部, 助教授 (40235982)
• キーワード: 全身性エリテマトーデス / RAG / 抗DNA抗体 / Bリンパ球 / レセプターエディティング / アポトーシス

研究概要

SLEでの自己抗体産生にはレセプターエディティング(RE)の不調が関わる。REの不調にRAG発現が関与するのかを検討した。SLEB細胞では非刺激状態でB細胞にRAG1,RAG2を過剰に発現しており、SAC+IL-2刺激による発現の増強を認めなかった。この成績はループスモデルマウスB細胞で報告されているRAG過剰発現と一致した成績である。SLE患者B細胞から抗DNA抗体産生B細胞を分離した。方法はビオチン化DNAを患者B細胞と反応させた後、磁力を用いてDNA結合B細胞と非結合B細胞に分離した。DNA非結合B細胞はRAGを過剰に発現し、SAC+IL-2刺激後もRAGは持続的に発現していた。一方、DNA結合B細胞は非刺激状態でもSAC+IL-2刺激を行ってもRAGの発現を認めることはなかった。同様に、DNA非結合B細胞はRAGmRNAを過剰に発現した。DNA結合B細胞では非刺激でもSAC+IL-2刺激を加えてもRAGmRNAの発現は認めなかった。即ちSLE患者の抗DNA抗体産生B細胞はRAGを発現できないことが示された。SLE抗DNA抗体産生B細胞がRAGの発現を経てアポトーシスに陥ることがあるのかAnnexinVを用いて検討した。RAGを恒常的に発現しているDNA非結合B細胞にはアポトーシス細胞を認めた。これに対してRAGを全く発現しないDNA結合B細胞はアポトーシスに陥らなかった。即ち、DNA結合B細胞はRAGを発現せず、REを起こさず、アポトーシスにもならず生体内で存続し続けることが示された。この成績は、SLE患者抗DNA抗体産生B細胞ではRAGは発現されず、REもアポトーシスも起こらずSLE患者抗DNA抗体産生B細胞は自己抗体遺伝子の産生が持続することを示している。即ちSLE患者B細胞は過剰にRAGを発現しているにもかかわらず、SLE患者抗DNA抗体産生B細胞ではRAGの発現は全く認められない。このためにSLE患者抗DNA抗体産生B細胞は自已反応性B細胞レセプターがREを起こすことなく、またアポトーシスで除去されることもなく、抗DNA抗体産生を維持することで、SLEの病態形成に至ると考えられた。

研究成果

• [文献書誌] Takeba Y, Suzuki N, Wakisaka S, Takeno M, Kaneko A, Asai T, Sakane T: "Involvement of cAMP responsive element binding protein (CREB) in the synovial cell hyperfunction in patients with rheumatoid arthritis"Clin Exp Rheumatol. 18. 47-55 (2000)
• [文献書誌] Wakisaka S, Suzuki N, Kaneko A, Asai T, Sakane T: "Characterization of tissue outgrowth developed in vitro in patients with rheumatoid arthritis ; involvement of T cells in the development of tissue outgrowth"Int Arch Allergy Immunol. 121. 68-79 (2000)
• [文献書誌] Yokoe T, Suzuki N, Minoguchi K, Adachi M, Sakane T: "Analysis of IL-12 receptor B2 chain expression of circulating T lymphocytes in patients with atopic asthma"Cell Immunol. 208. 34-42 (2001)
• [文献書誌] Suzuki N, Takeno M, Takeba Y, Miyagi T, Ye JM, Nagafuchi H, Sakane T: "Induction of differentiation of mouse embryonic stem (ES) cells in culture. I. Treatment with BMP-2 and BMP-4 induces chondrocyte differentiation"The St.Marianna Medical Journal. 29. 25-31 (2001)
• [文献書誌] Takeba Y, Suzuki N, Kaneko A, Asai A, Sakane T: "Endorphin and enkephalin ameliorate excessive synovial cell functions in patients with rheumatoid arthritis"J Rheumatol. 28・10. 2176-2183 (2001)
• [文献書誌] Kasiwakura J, Suzuki N, Takeno M, Itoh S, Oku T, Sakane T, Nakajin S, Toyosima S: "Evidence of autophosphorylationin Txk : Y91 is autophosphorylation site"Biological & Pharmaceutical Bulletin. (in press). (2002)
• [文献書誌] Takeba Y, Nagafuchi H, Takeno M, Kasiwakura J, Suzuki N, Takeba Y, Nagafuchi H, Takeno M, Kasiwakura J, Suzuki N: "Txk, a member of non-receptor tyrosine kinase of Tec family acts as a Th1 cell specific transcription factor and regulates IFN-gamma gene transcription"J Immunol. 168・5. 2365-2183 (2002)
• [文献書誌] Mihara S, Suzuki N, Takeba Y, Soejima K, Yamamoto Y: "Combination of molecular mimicry and aberrant autoantigen expression is important for development of anti-Fas ligand autoantibodies in patients with SLE"Clin Exp Immunol. (in press). (2002)
• [文献書誌] 坂根剛, 鈴木登: "全身性エリテマトーデスにおける自己抗体産生の分子免疫学的機序"日本臨床免疫学会雑誌. 23. 499-504 (2001)
• [文献書誌] 下山義博, 岳野光洋, 永渕裕子, 鈴木登, 坂根剛: "べーチェット病患者好中球における自発的なサイトカイン産生"炎症. 20. 157-164 (2001)
• [文献書誌] 高井憲治, 小川賢一, 岳野光洋, 鈴木登, 坂根剛: "聖マリアンナ医科大学免疫学・病害動物学教室において過去8年間に経験した寄生虫・衛生動物疾患の検討"聖マリアンナ医科大学雑誌. 29. 15-20 (2001)
• [文献書誌] 橋本博史, 吉木敬, 鈴木和男, 徳永勝士, 有村義宏他: "厚生労働省厚生科学特定疾患・難治性血管炎に関する調査研究報告"日本臨床免疫学会誌. 24. 336-346 (2001)
• [文献書誌] Sakane T, Suzuki N: "Neuro-endocrine-immune axis in human rheumatoid arthritis"Archivum Immunologiae et Therapiae Experimentalis. 48. 533-535 (2000)
• [文献書誌] 鈴木登: "特殊型重症べーチェット病の治療"今月の治療. 8. 533-535 (2000)
• [文献書誌] 星野孝, 坂根剛, 鈴木登, 玉木京子: "神経・内分泌・免疫系の変動よりみた癌免疫療法-現状と将来"癌治療と宿主. 12. 350-362 (2000)
• [文献書誌] 武半優子, 鈴木登: "神経ペプチドによる炎症の制御"臨床免疫. 35. 314-319 (2001)
• [文献書誌] 鈴木登: "医学と医療の最前線.膠原病と神経・内分泌・免疫系の関わり"日本内科学会雑誌. 90. 153-161 (2001)
• [文献書誌] 鈴木登: "膠原病における進歩と今後の展望:全身性エリテマトーデス患者自己抗体産生細胞のアポトーシス回避機構の解析とその是正"炎症・再生. 21・6. 635-638 (2001)
• [文献書誌] 鈴木登: "ループス腎炎発症関連遺伝子とレセプターエディティング"炎症・再生. 21・5. 557-563 (2001)
• [文献書誌] 鈴木登: "膠原病-診断治療の進歩 Behcet病"医学のあゆみ. 199・5. 411-415 (2001)
• [文献書誌] 鈴木登: "RAにおけるRAG発現異常"RA&セラピー. 7・4. 32-39 (2001)
• [文献書誌] 鈴木登: "TxkによるTh1サイトカイン発現誘導"臨床免疫. 36・5. 687-693 (2001)
• [文献書誌] 鈴木登, 武半優子: "オピオイドペプチドと関節炎"リウマチ科. 25・6. 523-527 (2001)
• [文献書誌] Sakane T, Suzuki N, Takeno M: "Innate and acquired immunity in Behcet's disease. Behcet's Disease"D Bang, E-S Lee, and S Lee. 673 (2000)
• [文献書誌] Suzuki N: "The pathogenic role of prolactin in patients with rheumatoid arthritis. Neuroimmune Biology, vol.3"R Rapaport and L Matera (in press). (2002)
• [文献書誌] Sakane T, Suzuki N: "Neuro-endocrine-immune axis in human rheumatoid arthritis"Autoimmunity Kluwer Academic Publishers. 417-427 (2000)
• [文献書誌] Sakane T, Suzuki N: "Behcet's syndrome. The Molecular Pathology of Autoimmunity Second Edition"A N Theofilopoulos and C A Bona (in press). (2002)
• [文献書誌] Suzuki N, Takeno M, Takebe Y, Nagafuchi H, Sakane T: "Autoimmunity in Behcet's disease. Immunology of Behcet's disease"M Zierhut, S Ohno (in press). (2002)
• [文献書誌] Takeno M, Simoyama Y, Nagafuchi H, Suzuki N, Sakane T: "Neurophil hyperfinction on Behcet's disease. Immunnology of Behcet's disease"Zierhut, S Ohno (in press). (2002)
• [文献書誌] 鈴木登: "自己抗体産生Bリンパ球におけるRAG発現異常,自己抗体と自己抗体と自己免疫'00、第7回自己抗体と自己免疫シンポジウム講演録集"((株))医学生物研究所. 31-38 (2000)
• [文献書誌] 鈴木登, 板根剛: "Th1細胞分化とTecファミリー非レセプター型細胞内チロシンキナーゼTxk, Annual Review免疫2001"中外医学社. 66-72 (2000)
• [文献書誌] 鈴木登: "原発性免疫不全症候群,在宅介護のための難病ガイド"日本医学出版. 120-121 (2000)
• [文献書誌] 鈴木登: "好酸球増多症候群,在宅介護のための難病ガイド"日本医学出版. 93-94 (2000)
• [文献書誌] 板根剛, 岳野光洋, 鈴木登: "ベーチェット病,リウマチナビゲーター"メディカルレビュー. 198-199 (2000)
• [文献書誌] 板根剛, 鈴木登: "修飾自己抗原,免疫学辞典第2版"東京化学同人. 341 (2001)
• [文献書誌] 板根剛, 鈴木登: "皮膚分化抗原,免疫学辞典第2版"東京化学同人. 508 (2001)
• [文献書誌] 板根剛, 鈴木登: "老衰細胞抗原,免疫学辞典第2版"東京化学同人. 672 (2001)
• [文献書誌] 鈴木登: "免疫不全の分子機構,わかりやすい内科学第2版"文光堂. 310-313 (2002)