概日リズム障害の遺伝子解析及び複数の遺伝子が関与する疾患の解析モデルの構築

2000 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 12470198
• 研究機関: 埼玉医科大学
• 研究代表者: 海老沢 尚 埼玉医科大学, 医学部, 講師 (00201369)
• 研究分担者: 岩瀬 利郎 埼玉医科大学, 医学部, 助手 (80306307)
• キーワード: 概日リズム / 時計遺伝子 / 遺伝子多型 / 睡眠覚醒リズム障害 / SSCP / period遺伝子 / Clock遺伝子

研究概要

今年度は、睡眠相後退症候群、非24時間睡眠覚醒症候群を対象に、ヒトの概日リズム形成に大きな役割を果たしていると思われるPer3遺伝子及びClock遺伝子の解析を行った。他施設よりhuman Per3のcDNA配列の情報を得、データベース上に公開されているゲノム配列と比較して、その翻訳領域が21のエクソンから成立していることを明らかにした。それぞれのエクソンに関し、78名の概日リズム障害患者(非24時間睡眠覚醒症候群[N-24]30名、睡眠相後退症候群[DSPS]48名)及び100名の正常被験者のゲノムDNAを対象に、PCR法に基づく方法で多型解析を行った。その結果ミスセンス多型が複数見いだされ、その組み合わせによりhPer3遺伝子は計4つのハプロタイプを形成していることが判明した。ハプロタイプの一つは正常群と比較してDSPSに約7倍の頻度で見られ(P=0.037)、疾患発症の危険因子となっていることが示唆された(印刷中)。しかし、正常被験者の中にもそのハプロタイプを持つヒトが少数ながら存在するため、DSPSの発症は複数の要因が関与していると考えられた。
Clock遺伝子についても全エクソンについて多型解析が終了し、ミスセンス多型を含む複数の変異を見いだした(投稿準備中)。温度調節ヘテロ2本鎖分析(TMHA)法を使った変異解析も開始した。
我々の発表と前後し、米国から睡眠相前進症候群(ASPS)の一部の原因遺伝子がPer2遺伝子だったとの報告が発表された。概日リズムの病的・生理的個体差はこれらの生体時計関連遺伝子の多型の組み合わせによって生じると考えられる。今後もhCry1・2,BMAL1,hPer1,hPer2など時計遺伝子の解析を順次続け、遺伝子多型の組み合わせと概日リズム障害との相関関係を総合的に掌握する。

研究成果

• [文献書誌] Takashi Ebisawa et al.: "Association of structural polymorphisms in the human period3 gene with delayed sleep phase syndrome."EMBO Reports. (In press). (2001)
• [文献書誌] Masaaki Ikeda,Wangjie Yu,Momoki Hirai,Takashi Ebisawa et al.: "cDNA cloning of a novel bHLH-PAS transcription factor superfamily gene, BMAL2; Its mRNA expression, subcellular distribution, and chromosomal localization."Biochem.Biophys.Res.Commun.. 275. 493-502 (2000)
• [文献書誌] 海老澤尚: "睡眠覚醒リズム障害と時計遺伝子"神経研究の進歩. 44・6. 891-897 (2000)
• [文献書誌] 海老沢尚: "生体時計の分子機構-ストレスへの時間生物学的アプローチに向けて-"日本神経精神薬理学雑誌. 20. 107-111 (2000)
• [文献書誌] 海老沢尚: "家族性致死性不眠症"Clinical Neuroscience. 18・10. 94-95 (2000)
• [文献書誌] 海老沢尚: "生体リズム障害の分子生物学"臨床脳波. 42・10. 629-633 (2000)
• [文献書誌] 海老澤尚: "睡眠覚醒リズム障害と遺伝子変異"自律神経. 37・2. 158-162 (2000)
• [文献書誌] 海老澤尚: "概日リズム障害と遺伝子変異"脳と精神の医学. 11・1. 1-7 (2000)
• [文献書誌] 山内俊雄,海老澤尚: "生物学的精神医学研究の限界と将来"精神医学. 42・3. 263-271 (2000)