多発性骨髄腫における分子基盤に基づく至適治療法の開発

2000 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 12470202
• 研究機関: 名古屋市立大学
• 研究代表者: 上田 龍三 名古屋市立大学, 医学部, 教授 (20142169)
• 研究分担者: 飯田 真介 名古屋市立大学, 医学部, 助手 (50295614) ; 脇田 充史 名古屋市立大学, 医学部, 助教授 (20264715)
• キーワード: 多発性骨髄腫 / 染色体転座 / 二重色FISH法 / t(14;20)(q32;q11) / t(1;14)(p36;q32) / MGUS / Ku80

研究概要

平成12年度の研究計画に基づいて下記の研究結果を得た。
1.多発性骨髄腫においてノンランダムに認められる染色体転座であるt(14;20)(q32;q11)の20q11領域の転座切断点がFISH法によりKLAA0823とMAFB遺伝子の間の680kb以内に存在することを明らかにした。同領域のPACクローンを用いてエクソントラップ法等を用いて標的遺伝子の同定を試みた結果、免疫グロブリン遺伝子のαエンハンサーによる脱制御を受けてMAFB遺伝子が異所性に発現していることを見い出した。同時にt(14;20)転座を検出する二重色FISH診断法も確立し、臨床検体での解析を開始している。
2.1と同様にt(1;14)(p36;q32)転座の1p36領域の切断点がE3/LAPTM5遺伝子内に存在することを見い出した。現在、転座による遺伝子発現抑制の機序および切断点近傍に別の標的遺伝子が存在するか否かについても検討を進めている。
3.骨髄腫の前癌病変であるMGUSおよびくすぶり型骨髄腫症例20例の骨髄液からインフォームドコンセントを得た後、抗CD138抗体ビーズを用いて形質細胞を単離した。90%以上の純度を有する試料につきカルノア検体を作成した。4.N/K-RAS遺伝子の変異を容易にスクリーニングするPCR-RFLP法を確立した。また、JCOG-LSGグループにおいて登録される骨髄腫症例において腫瘍細胞に認められるこれらの体細胞遺伝子変異解析を行うための研究計画書の作成を行っている。
5.骨髄腫細胞株15株において染色体不安定性に関与することが報告されているKu80遺伝子の変異の有無、遺伝子再構成の有無およびmRNA、蛋白レベルでの発現を調べた。2アレルで異常を認めた細胞株は認めず骨髄腫発症への関与は少ないものと結論した。

研究成果

• [文献書誌] Iida,S.: "A novel human multiple myeloma derived cell line, NCU-MM-1, carrying t(2;11)(p11;23) and t(8;22)(q24;q11) chromosomal tra nslocations with overexpression of c-Myc protein."International Journal of Hematology. 72・1. 85-97 (2000)
• [文献書誌] Tsuboi,K.: "MUM1/IRF4 expression as a frequent event in mature lymphoid malignancies."Leukemia. 14. 449-456 (2000)
• [文献書誌] Zhao,M.: "In vivo treatment of mutant FLT3-transformed munne leukemia with A Tyrosine kinase inhibitor"Leukemia. 14. 374-378 (2000)
• [文献書誌] Takeyama,K.: "Therapy-related leukemia and myelodysplastic syndrome : a large-scale Japanese study of clinical and cytogenetic features as well as prognostic factors"Int.J.Hematol.. 71. 144-152 (2000)
• [文献書誌] Takeshita,A.: "Quantitative expression of erythropoietin receptor (EPO-R) on acute leukaemia cells : relationships between the amount of EPO-R and CD phenotypes, in vitro proliferative response, the amount of other cytokine receptors and clinical prognosis"Brit.J.Haematol.. 108. 55-63 (2000)
• [文献書誌] Hayashi,K.: "Usefulness of uracil loading test for detecting 5-flurorouracil metabolic enzyme deficiencies in humans."Int.J.Clin.Oncol.. 5. 171-173 (2000)
• [文献書誌] Ohnishi,K.: "Multicenter prospective study of interferon alpha and conventional chemotherapy versus bone marrow transplantation for newly diagnosed patients with chronic myelogenous leukemia."Int.J.Hematol.. 72. 229-236 (2000)
• [文献書誌] Murata,M.: "Apoptotic cytotoxic effects of a histone deacetylase inhibitor, FK228,on malignant lymphoid cells"Jpn.J.Cancer Res.. 91. 1154-1160 (2000)
• [文献書誌] Hatzivassiliou G.: "IRTA1 and IRTA2, novel immunoglobulin superfamily receptors expressed in B cells and involved in chromosome 1q21 abnormalities in B cell malignancy "Immunity. (in press) . (2001)