多発性骨髄腫における分子基盤に基づく至適治療法の開発

2003 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 12470202
• 研究機関: 名古屋市立大学
• 研究代表者: 上田 龍三 名古屋市立大学, 大学院・医学研究科, 教授 (20142169)
• 研究分担者: 飯田 真介 名古屋市立大学, 大学院・医学研究科, 講師 (50295614) ; 脇田 充史 名古屋市立大学, 大学院・医学研究科, 助教授 (20264715)
• キーワード: 多発性骨髄腫 / 染色体転座 / 定量PCR / 病型 / 進展

研究概要

骨髄穿刺検査の際に文書にて検体の研究利用についても御同意をいただいた多発性骨髄腫患者約60症例の骨髄液0,5〜1mlから形質細胞を抗CD138抗体ビーズを用いて純化しその全RNAを抽出した。逆転写酵素を用いてcDNAに変換しDNAse処理後、6種類の染色体転座関連遺伝子発現(CCND1,FGFR3,c-MYC, MUM1,C-MAF, MAFB)をLight Cyclerを用いたRT/RQ-PCR法にて定量した。さらに微量なcDNAからN-RAS, K-RAS遺伝子を増幅しその点突然変異の有無について遺伝子配列を決定して検討した。その結果CCND1,FGFR3,c-MAF, MAFB遺伝子は、染色体転座を有する症例ではspiked expressionを示していた。それに対してc-MYCとMUM1遺伝子は発現の高い症例から低い症例まで連続的に分布していた。既に解析が終了した30症例においては、8例にCCND1、6例にFGFR3の異所性発現を認めた。FGFR3発現陽性例6例全てでIgH-MMSETキメラ遺伝子発現を認めたが、1例においてはIgH-MMSETキメラ遺伝子のみが発現しておりFGFR3発現は陰性であった。そしてCCND1陽性8例中3例でc-MYC、2例でMUM1の強発現を認めた。FGFR3陽性6例中3例でc-MAFの異所性発現を認めた。またc-MAFとc-MYCの過剰発現を認めた症例が2例あり内1例は原発性形質細胞性白血病でありもう1例は難治性骨髄腫例であった。すなわちCCND1陽性骨髄腫はc-MYCやMUM1など増殖関連転写制御因子の異常発現を伴い進展し、FGFR3陽性骨髄腫はc-MAF活性化により進展することが示唆され、骨髄腫の発症過程には幾つかの異なったパスウェイが存在する事が示された。また同一症例の再燃時に初発時に見られなかったRAS遺伝子変異を認める症例もあり骨髄腫の進展の仕方には様々な要因が存在するものと考えられた。残りの30症例についても解析を続けており臨床病態や予後との関連について統計学的な解析を進めているが、少なくとも多発性骨髄腫には、CCND1陽性型、FGFR3(IgH-MMSET)陽性型、C-MAF/MAFB陽性型の3種類の異なった病型が存在しており病型毎に治療方針を決めてゆく必要のある事が示唆される結果となった。

研究成果

• [文献書誌] Iida, S., Ueda, R.et al.: "Multistep tumorigenesis of multiple myeloma : its molecular delineation"Int.J.Hematology. 77. 207-212 (2003)
• [文献書誌] Miura, K., Ueda, R.et al.: "Frequent occurrence of CCND1 deregulation in patients with early stages of plasma cell dyscrasia"Cancer Science. 94(4). 350-354 (2003)
• [文献書誌] Nomura, K., Ueda, R.et al.: "Detection of t(11;18)(q21;q21) in marginal zone lymphoma of mucosa-associated lymphocytic tissue type on paraffin-embedded tissue sections by using fluorescence in situ hybridization"Cancer Genetics and Cytogenetics. 140. 49-54 (2003)
• [文献書誌] Luo, J.M., Iida, S., Ueda, R.et al.: "Possible dominant-negative mutation of the SHIP gone in acute myeloid leukemia"Leukemia. 17. 1-8 (2003)
• [文献書誌] Okabe, M., Ueda, R.et al.: "API2-MALT1 fusion defines a distinctive clinicopathologic subtype in pulmonary extranodal marginal zone B-cell lymphoma of mucosa-associated lymphoid tissue"Am.J.Pathology. 162(4). 1113-1122 (2003)
• [文献書誌] Ito, H., Ueda, R.et al.: "A limited association of OGG1 ser326Cys polymorphism for adenocarcinoma of the lung"J.Epidemiology. 12(3). 258-265 (2003)
• [文献書誌] Kato, H., Ueda, R et al.: "Frequent coinfection with hepatitis B virus strains of distinct genotypes detected by hybridization with type-specific probes immobilized on a solid-phase support"J.Virological Methods. 12(3). 258-265 (2003)
• [文献書誌] Miyazaki, M., Ueda, R et al.: "Potential limitations in using minor histocompatibility antigen-specific cytotoxic T cells for targeting solid tumor cells"Clinical Immunology. 110. 29-35 (2003)
• [文献書誌] Hayami, Y., Iida, S., Ueda, R.et al.: "Inactivation of the E3/LAPTm5 gene by chromosomal rearangement and DNA methylation in human multiple myeloma"Leukemia. 17. 1650-1657 (2003)
• [文献書誌] Tsuboi, K., Ueda, R.et al.: "T-cell acute lymphoblastic leukemia as a secondary leukemia after a 3-year remission of acute myelocytic leukemia"Int.J.of Hematology. 77. 518-521 (2003)
• [文献書誌] Ishida, T., Iida, S., Ueda, R.et al.: "Clinical significance of CCR4 expression in adult T-cell leukemia/lymphoma : its close association with skin involvement and unfavorable outcome"Clinical Cancer Res.. 9. 3625-3634 (2003)
• [文献書誌] Ozeki, K., Ueda, R., et al.: "Biologic and clinical significance of the FLT3 transcript level in acute myeloid leukemia"Blood. 103(5). 1901-1908 (2004)
• [文献書誌] Kikuchi, M., Ueda, R.et al.: "Histopathological investigation of salivary glands in the asymptomatic elederly"Arch.Gerontol.Geriatr. 38. 131-138 (2004)
• [文献書誌] Niwa, R., Ueda, R.et al.: "Defucosylated chimeric anti-CCR4 IgG1 with enhanced antibody-dependent cellular cytotoxicity shows potent therapeutic activity to T cell leukemia and lymphoma"Cancer Res.. 64. 2127-2133 (2004)